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標(biāo)簽:肝酯酶(Hepatic lipase HL)試劑盒
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公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
肝酯酶(Hepatic lipase,HL)試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63842 |
注意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的膽固醇向類固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時,血漿中小顆??蓪?dǎo)致LDL水平升高,加速動脈粥樣硬化的發(fā)生。
測定原理
肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。
自備實驗用品及儀器
天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配制
試劑一:液體110mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
1.組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后于4℃,10000g離心10min,取上清待測。
3.血清:直接測定。
測定操作
計算公式
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y= 0.1519 x -0.1241,R2=0.9994
1.按照蛋白濃度計算
酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/mg prot)= (△A+0.1241)÷0.1519×V反總÷(V樣×Cpr)÷T
= 6.58×(△A+0.1241)÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義:每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/g 鮮重)= (△A+0.1241)÷0.1519×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 6.58×(△A+0.1241)÷W
3.按照細(xì)胞數(shù)量計算
酶活性定義:每104個細(xì)胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/104 cell)= (△A+0.1241)÷0.1519×V反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T
= 6.58×(△A+0.1241)÷細(xì)胞數(shù)量
4.按照液體體積計算
酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。HL活性(μmol /min/mL)=(△A+0.1241)÷0.1519×V反總÷V樣÷T
= 6.58×(△A+0.1241)
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,10min
b.用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y= 0.076 x -0.1241,R2=0.9994
1.按照蛋白濃度計算
酶活性定義:每毫克蛋白每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/mg prot)= (△A+0.1241)÷0.076×V反總÷(V樣×Cpr)÷T
= 13.16×(△A+0.1241)÷Cpr
2.按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義:每克組織每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/g 鮮重)= (△A+0.1241)÷0.076×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T
= 13.16×(△A+0.1241)÷W
3.按照細(xì)胞數(shù)量計算
酶活性定義:每104個細(xì)胞每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。
HL活性(μmol /min/104 cell)= (△A+0.1241)÷0.076×V反總÷(V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T
= 13.16×(△A+0.1241)÷細(xì)胞數(shù)量
4.按照液體體積計算
酶活性定義:每毫升血清每分鐘水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生1μmol α-萘酚為一個酶活力單位。HL活性(μmol /min/mL)=(△A+0.1241)÷0.076×V反總÷V樣÷T
= 13.16×(△A+0.1241)
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,10min
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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