1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細胞
Saos-2,人成骨肉瘤細胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞
EC109,人食管癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
AGS人胃腺癌細胞
THP-1人單核白血病細胞
HuH-7人肝癌細胞
RBE, 人肝膽管癌細胞
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細胞
QGY-7701, 人肝癌細胞
PANC-1, 人胰腺癌細胞
U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞
Hep G2, 人肝癌細胞系
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞
QBC-939, 人膽管癌細胞
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系
SK-N-SH, 人神經(jīng)母細胞瘤細胞
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司