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產(chǎn)品名稱	檢測方法	規(guī)格	貨號
蔗糖磷酸合成酶（Sucrose phosphate synthase，SPS）試劑盒	微量法	100管/48樣	CS-01Ｓ63834

注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物，也是植物體內(nèi)運輸?shù)闹饕镔|(zhì)，還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS（EC 2.4.1.14）以果糖-6-磷酸為受體，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。

商品介紹：

測定原理

蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。

需自備的的儀器和用品

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰

試劑的組成和配制

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體2.5mL×1瓶，-20℃保存；

試劑二：1000μg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：液體2mL×1瓶，4℃保存

試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存；

試劑五：液體6mL×1瓶，4℃避光保存；

樣品測定的準備：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至480nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測定，（在EP管中依次加入下列試劑）：

SPS活力單位的計算

1、按照蛋白濃度計算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SPS活性(μg /min/mg prot)= C標準管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標準管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標準管-A空白管)÷Cpr

2、按照樣本鮮重計算

單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SPS活性(μg /min/g鮮重) = C標準管×V1×（A測定管-A對照管)÷（A標準管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A測定管-A對照管)÷（A標準管-A空白管)÷W

C標準管：標準管濃度，1000μg/mL；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.01mL； V2：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；T ：反應(yīng)時間：10min。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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