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6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6 - phosphogluconate dehydrogenase, 6-PGDH)分光光度法

  • 產(chǎn)品貨號:CS-01S63242
  • 產(chǎn)品價格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度:399
  • 庫存:34
  • CAS號:
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6 - phosphogluconate dehydrogenase, 6-PGDH)質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6 - phosphogluconate dehydrogenase 6-PGDH) 

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商品詳情購物流程代測服務付款方式常見問題

 公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應各大科研單位和學校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應商。公司嚴把質(zhì)量關,確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6 - phosphogluconate dehydrogenase, 6-PGDH)

分光光度法

50/48

CS-0163242

 注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:

磷酸戊糖途徑途徑中6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和6PGDH依次催化NADPH合成,與能量的平衡、生長速率和細胞活力等密切相關。此外,6PGDH逆境生理中具有重要作用。

商品介紹:

測定原理:

6PGDH催化6-磷酸葡萄糖酸和NADP+生成NADPH,NADPH340 nm有特征吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm吸光度增加速率,計算6PGDH活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體47.5mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。

試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。

粗酶液提?。?/span>

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為1000~50001的比例(建議2000萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定操作:

1. 分光光度計預熱30min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 將試劑二和試劑三轉移至試劑一中充分溶解;在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

3. 1mL石英比色皿,依次加入50μL樣本和950μL試劑一,于340nm處測定3min內(nèi)吸光值變化,第10 s吸光值記為A1,第190s吸光值記為A2。△A=A2-A1

注意:空白管只需要做一次。

計算公式:

1、血清(漿)6PGDH活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個酶活力單位。

6PGDHnmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=1071.8×ΔA

2、組織、細菌或細胞中6PGDH活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

6PGDHnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=1071.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

6PGDHnmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=1071.8×ΔA÷W

3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol NADPH定義為一個酶活力單位。

6PGDHnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.536×ΔA

V反總:反應體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mLT:反應時間,3 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細菌或細胞總數(shù),2000萬。

注意:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司

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1、報價含普票、運費。

2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。

  

3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結果。

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