13585831301
021-59541103 021-60443211
3004967995
13585831301021-59541103 021-604432113004967995
在線訂購 免費(fèi)訂購熱線：021-59541103 021-60443211
標(biāo)簽:氨基比林-N-脫甲基酶（AND）試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機(jī):13585831301
Q Q： 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C（Cyt-C）ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求
兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
非紅細(xì)胞血影蛋白β4（SPTβN4）ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2（GSK2）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 氨基比林-N-脫甲基酶（AND）試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01Ｓ63213 |
注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定原理：
AND催化氨基比林釋放甲醛，通過Nash比色法測(cè)定甲醛含量，即可計(jì)算出AND活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、普通離心機(jī)，超速離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL玻璃比色皿、蒸餾水、無水乙醇和冰。
試劑組成和配制：
試劑一：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加50mL蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶（棕色瓶），4℃避光保存。臨用前加入2.6 mL無水乙醇，充分溶解。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6 mL蒸餾水，充分溶解。
試劑五：粉劑×1瓶，室溫保存。臨用前加蒸餾水10mL充分溶解。
試劑六：液體×1瓶，室溫保存。
試劑七：液體×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液：液體×1瓶，-20℃保存。臨用前取1.5 mL EP 管，加入10μl標(biāo)準(zhǔn)液，加990μl蒸餾水，混勻即為0.05 mmol/L標(biāo)準(zhǔn)甲醛溶液，4℃保存。
粗酶液提取：
1、除去細(xì)胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1 mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液轉(zhuǎn)入超速離心管。
2、粗制微粒體：4℃，100 000g，離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、最終微粒體：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5 mL，蓋緊后充分震蕩溶解，即粗酶液，待測(cè)。該待測(cè)液需當(dāng)天使用。
AND活性測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到412 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預(yù)熱30min。
3. 對(duì)照管：取1支EP管，加入50μL粗酶液，850μL試劑二，50μL試劑三，50μL蒸餾水，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入175μL試劑五，混勻后置于冰浴中5min；取出后加入175μL試劑六，混勻后室溫靜置5min；室溫8000rpm離心5min；取新的EP管，加入500μL上清液，500μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A對(duì)照管。
4. 測(cè)定管：取1支EP管，加入50μL粗酶液，850μL試劑二，50μL試劑三，50μL試劑四，混勻后置于37℃水浴保溫30min；立即加入175μL試劑五，混勻后置于冰浴中5min；取出后加入175μL試劑六，混勻后室溫靜置5min；室溫8000rpm離心5min；取1支新EP管，加入500μL上清液，500μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A測(cè)定管。
5. 標(biāo)準(zhǔn)管：取1支EP管，加入500μL標(biāo)準(zhǔn)品，500μL試劑七，混勻后60℃水浴10min，然后取出，用冷水冷卻5min，于412nm測(cè)定光吸收，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
注意：每個(gè)樣品都需要做對(duì)照管。
AND活性計(jì)算：
(1).按照蛋白濃度計(jì)算:
活性單位定義：37℃中每分鐘每毫克蛋白催化產(chǎn)生1nmol甲醛為1個(gè)酶活單位。
AND活性(nmol/min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)品×V標(biāo)準(zhǔn)品×（A測(cè)定管－A對(duì)照管）÷A標(biāo)準(zhǔn)管×稀釋倍數(shù)÷（Cpr×V樣）÷T
= 45×（A測(cè)定管－A空白管）÷A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr
(2).按照樣本質(zhì)量計(jì)算:
活性單位定義：37℃中每分鐘每克樣品催化產(chǎn)生1nmol甲醛為1個(gè)酶活單位。
AND活性(nmol/min/g 鮮重)= C標(biāo)準(zhǔn)品×V標(biāo)準(zhǔn)品×（A測(cè)定管－A對(duì)照管）÷A標(biāo)準(zhǔn)管×稀釋倍數(shù)÷(W×V樣)÷T
= 45×（A測(cè)定管－A對(duì)照管）÷A標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品：0.05 mmol/L=50μmol/L；V標(biāo)準(zhǔn)品：500μL=0.0005 L；稀釋倍數(shù)：V反總÷V上清液=（50+850 +50+50+175+175）÷500=2.7；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度mg/mL，需要另外測(cè)定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒；V樣：加入粗酶液體積，50μL=0.05mL；W：樣本質(zhì)量，g ；T：反應(yīng)時(shí)間，30min。
注意事項(xiàng)：
1、粗酶液需在當(dāng)日完成測(cè)定，如需保存，則向粗酶液提取步驟3的沉淀中加0.5ml 20%的甘油，分裝后，-80℃保存；
2、試劑三和試劑四需臨用前配制，如當(dāng)天沒有用完，4℃避光保存，可用1周；
3、粗酶液可直接用于蛋白濃度測(cè)定，建議用BCA法測(cè)蛋白含量。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
留言注意事項(xiàng)：
1.遵守中華人民共和國(guó)有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。
2.請(qǐng)您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個(gè)人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。
| 您感興趣的產(chǎn)品* | |
| 您的單位* | |
| 聯(lián)系人* | |
| 聯(lián)系電話* | |
| 詳細(xì)地址* | |
| 常用郵箱* | |
| 請(qǐng)輸入您對(duì)我們的意見或建議* | |
| 驗(yàn)證碼* | |
 |
產(chǎn)品訂購說明:
1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。
4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。
6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。
7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。
8、如因單位財(cái)務(wù)制度原因，可申請(qǐng)先發(fā)貨，報(bào)賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好客戶）。
普票匯款信息
賬 戶 名：上海生物
開 戶 行：中國(guó)銀行山東省分行營(yíng)業(yè)部
賬 號(hào)：2169 2341 6278
關(guān)于莼試
產(chǎn)品訂購
新手指南
幫助中心