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胰蛋白酶(Trypsin)試劑盒分光法50T/48S

  • 產(chǎn)品貨號:CS-01S63225
  • 產(chǎn)品價格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:50T/48S
  • 采購熱度:685
  • 庫存:53
  • CAS號:
  • 方法:分光法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:胰蛋白酶(Trypsin)試劑盒質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標(biāo)簽:胰蛋白酶(Trypsin)試劑盒 

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商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

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產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

胰蛋白酶(Trypsin)試劑盒

分光法

50T/48S

CS-0163225

 注意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:

胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈,是一種重要的消化酶。此外,胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。

商品介紹:

測定原理:

胰蛋白酶催化水解TAME的酯鍵,釋放出的游離羧基與反應(yīng)體系中的氫氧化鈉發(fā)生中和反應(yīng),導(dǎo)致溶液的pH值降低,以苯酚紅為指示劑,測定溶液在555nm處吸收值的變化,可以快速測得胰蛋白酶活性數(shù)據(jù)。胰蛋白酶在一定范圍內(nèi)與555nm處吸收值的降低呈良好的線性關(guān)系。

自備儀器和用品:

紫外可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體60 mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體4 mL×1瓶,4℃保存。

粗酶液提?。?/span>

1.組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)冰浴勻漿,10000g4℃離心10min,取上清,即粗酶液。

測定步驟:

1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到555 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 工作液的配制:臨用前根據(jù)用量按照試劑一(V):試劑二(V):蒸餾水(V):試劑三(V=1 mL1 mL5.4 mL0.4 mL的比例充分混合。(注意:現(xiàn)用現(xiàn)配,用多少配多少,在空瓶中配制,試劑盒中帶有4個空瓶)

3. 吸取25μL樣本,加入975 μL工作液,混勻后立即測定,記錄555nm1min時的吸光值A12min時的吸光值A2。計算△A=A1-A2

注意:如果△A小于0.005,可將反應(yīng)時間延長到5min。如果△A大于0.5,體系迅速變色,可將樣本用提取液稀釋后測定(建議稀釋10倍),計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

胰蛋白酶活性計算公式:

使用石英比色皿測定的計算公式如下

1)按蛋白濃度計算

活性單位定義:室溫下每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化555nm處吸光值減少11個酶活單位。

胰蛋白酶(U/mg prot= A ×V反總 ÷(Cpr×V1)÷T

=40×△A ÷Cpr

2)按樣本質(zhì)量計算

活性單位定義:室溫每克組織每分鐘催化555nm處吸光值減少11個酶活單位。

胰蛋白酶(U/g 鮮重)= A×V反總÷(W×V1÷V2)÷T

=40×△A ÷W

Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;W:組織質(zhì)量(g);V1:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(mL),25 μL=0.025 mL;V2:粗酶液總體積(mL),1 mL;V反總:反應(yīng)總體積,1 mLT:反應(yīng)時間(min),1 min。

注意:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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