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稱取0.01~0.02g烘干樣本（建議稱取約0.01g）于研缽中研碎，加入1mL試劑一，充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中，80℃水浴提取30min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑二（乙醚）振蕩5min，3000g，25℃離心5min，棄上清，留沉淀，加入1mL試劑三充分溶解，90℃水浴10min，冷卻后待測。

測定步驟：

1、分光光度計預(yù)熱30min以上，蒸餾水調(diào)零。

測定管：在EP管中依次加入100uL樣本， 70uL試劑四，600uL蒸餾水，10uL試劑五，220uL蒸餾水，混勻，分別測定550和743nm處吸光值，ΔA測定=A550-A743。

空白管：在EP管中依次加入100uL試劑三，70uL試劑四，600uL蒸餾水，10uL試劑五，220uL蒸餾水，混勻，分別測定550和743nm處吸光值，ΔA空白=A550-A743。

支鏈淀粉含量計算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y=0.1214x+0.0076；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y為吸光值。

1、按照蛋白濃度計算

支鏈淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷Cpr

2、按樣本干重計算

支鏈淀粉含量(mg/g干重)= [(ΔA測定-ΔA空白-0.0076)×V1] ÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA測定-ΔA空白-0.0076) ÷W

V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g

最低檢測限為10mg/g干重或0.1mg/mgprot。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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支鏈淀粉含量試劑盒分光光度法50管/48樣

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