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糖原合成酶（Glycogen synthase，GCS）試劑盒分光光度法50管/48樣

  • 產(chǎn)品貨號：CS-01Ｓ63308
  • 產(chǎn)品價(jià)格：電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:50管/48樣
  • 采購熱度：340
  • 庫存：28
  • CAS號：
  • 方法：分光光度法
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內(nèi)容：糖原合成酶（Glycogen synthase，GCS）試劑盒質(zhì)量可靠、價(jià)格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)。

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標(biāo)簽:糖原合成酶（Glycogen synthase GCS）試劑盒 

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產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

糖原合成酶（Glycogen synthase，GCS）試劑盒

分光光度法

50管/48樣

CS-01Ｓ63308
 注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：

GCS（EC 2.4.1.11）催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UTP，以α-1，4-糖苷鍵相連延長糖鏈，是肝和肌肉糖原合成酶的限速酶，是胰島素作用的主要靶酶，對糖代謝的調(diào)節(jié)和血糖穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用。

商品介紹：

測定原理：

GCS催化UDPG和葡萄糖殘基生成糖原和UDP，丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADH氧化生成NAD+，在340nm下測定NADH下降速率，即可反映GCS活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：60mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體45 mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存；

試劑三：液體41μL×1支，4℃保存；

試劑四：粉劑×1支， -20℃保存；

試劑五：粉劑×1瓶， -20℃保存；

樣本的前處理：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、工作液的配制：臨用前將試劑三和試劑四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

3、試劑五的配制：臨用前在試劑五瓶中加入2.5mL試劑二充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

4、將工作液和試劑五置于37℃預(yù)熱5分鐘。

5、在1mL石英比色皿中加入50μL樣本、50μL試劑五和900μL工作液，立即混勻，記錄340nm處初始吸光值A1和1min后的吸光值A2，計(jì)算ΔA=A1-A2。

注意：在該試劑盒中，若ΔA大于0.1，需將樣本用提取液稀釋適當(dāng)倍數(shù)后測定，使ΔA小于0.1可提高檢測靈敏度。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

GCS活性計(jì)算：

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GCS（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=3215×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算

單位定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol NADH定義為一個酶活力單位。

GCS（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總)÷T=3215×ΔA÷W

V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，1 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。

注意：
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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