產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱(chēng)	檢測(cè)方法	規(guī)格	貨號(hào)
丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63327

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸，生成過(guò)氧化脂質(zhì)；后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物，其中包括MDA。通過(guò)檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。

商品介紹：

測(cè)定原理：

MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成紅色產(chǎn)物，在532nm有最大吸收峰，進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過(guò)氧化脂質(zhì)的含量；同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度，利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配置：

提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體40mL×1瓶，4℃保存；

注意事項(xiàng)：

臨用前注意試劑一是否完全溶解，如未溶解，可以70℃-90℃加熱，并振蕩以促進(jìn)溶解。

MDA提取：

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟：

1、吸取0.6mL 試劑一于1.5mL離心管中，再加入0.2mL樣本, 混勻。

2、95℃水浴中保溫30min（蓋緊，防止水分散失），置于冰浴中冷卻，10000g，25℃，離心10min。

3、吸取上清液于1mL玻璃比色皿中，測(cè)定532nm和600nm處的吸光度，記為A532和A600，ΔA= A532-A600。

MDA含量計(jì)算：

1、血清（漿）中MDA含量的計(jì)算：

MDA含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣=25.8×ΔA

2、細(xì)菌、細(xì)胞或動(dòng)物組織中MDA含量計(jì)算

（1）按照蛋白濃度計(jì)算

MDA含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V樣)=25.8× ΔA ÷Cpr

需要另外測(cè)定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒。

（2）按照樣品質(zhì)量計(jì)算

MDA含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總)=25.8×ΔA ÷W

(3 ) 按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

MDA含量(nmol/104)=[ ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)=0.0516×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積， 8×10-4 L；ε：丙二醛摩爾消光系數(shù)，155×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.2 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬(wàn)。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢(xún)客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專(zhuān)人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

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