產(chǎn)品目錄

線粒體復(fù)合體Ⅲ（EC 1.10.2.2）又稱CoQ-細(xì)胞色素C還原酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分，負(fù)責(zé)把還原型CoQ的氫傳遞給細(xì)胞色素C，生成還原型細(xì)胞色素C。

商品介紹：

測(cè)定原理

與氧化型細(xì)胞色素C不同，還原型細(xì)胞色素C在550nm有特征光吸收，因此550nm光吸收增加速率能夠反映線粒體復(fù)合體Ⅲ酶活性。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

試劑一：25mL×1瓶，-20℃保存；

試劑二：5mL×1瓶，-20℃保存；

試劑三：0.5 mL×1支，-20℃保存；

試劑四：液體20mL×1瓶，4℃保存；

試劑五：粉劑×1支，-20℃保存；

試劑六：液體2.5mL×1瓶，-20℃保存；

樣本的前處理：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

1、準(zhǔn)確稱取0.1g組織或收集500萬細(xì)菌或細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2、將勻漿600g，4℃離心5min。

3、棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心10min。

4、上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅲ（此步可選做）。

5、步驟④中的沉淀即為線粒體，加入200uL試劑二和2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10秒，重復(fù)30次），用于復(fù)合體Ⅲ酶活性測(cè)定。

測(cè)定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至550nm，蒸餾水調(diào)零。

2、樣本測(cè)定

（1）工作液的配制：臨用前把試劑五轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解，置于37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）孵育5min；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。

（2）在1mL玻璃比色皿中加入40μL樣本、100μL試劑六和800μL工作液，立即混勻，記錄550nm處初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2，計(jì)算ΔA=A2-A1。

復(fù)合體Ⅲ活力單位的計(jì)算：

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 nmol 還原型細(xì)胞色素C定義為一個(gè)酶活力單位。

復(fù)合體Ⅲ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V樣) ÷T=615×ΔA÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

（2）按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol 還原型細(xì)胞色素C定義為一個(gè)酶活力單位。

復(fù)合體Ⅲ活力(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=124×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol還原型細(xì)胞色素C定義為一個(gè)酶活力單位。

復(fù)合體Ⅲ活力(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.248×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，9.4×10-4 L；ε：細(xì)胞色素C摩爾消光系數(shù)，1.91×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.04 mL；V樣總：加入提取液體積，0.202 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，500萬。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

在線咨詢

留言注意事項(xiàng)：

1.遵守中華人民共和國有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。

2.請(qǐng)您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。

3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個(gè)人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。

您感興趣的產(chǎn)品*
您的單位*
聯(lián)系人*
聯(lián)系電話*
詳細(xì)地址*
常用郵箱*
請(qǐng)輸入您對(duì)我們的意見或建議*
驗(yàn)證碼*

同類產(chǎn)品

訂購流程

訂貨流程

產(chǎn)品訂購說明:

1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。

8、如因單位財(cái)務(wù)制度原因，可申請(qǐng)先發(fā)貨，報(bào)賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

賬戶名：上海生物

開戶行：中國銀行山東省分行營業(yè)部

賬號(hào)：2169 2341 6278

為方便廣大客戶辦理貨款我公司提供多個(gè)銀行的賬戶，學(xué)校、醫(yī)院客戶購買產(chǎn)品如因單位財(cái)務(wù)制度原因可先發(fā)貨待報(bào)賬后匯款，請(qǐng)及時(shí)告知銷售人員已做具體操作。

線粒體復(fù)合體Ⅲ試劑盒分光光度法25管/24樣

產(chǎn)品目錄

聯(lián)系我們

技術(shù)服務(wù)

商品詳情購物流程代測(cè)服務(wù)付款方式常見問題

在線咨詢

同類產(chǎn)品

訂貨流程

付款方式