產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品名稱	檢測方法	規(guī)格	貨號
堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP/ALP）活性測定試劑盒	分光光度法	50管/24樣	CS-01Ｓ63351

注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。

商品介紹：

測定原理：

在堿性環(huán)境中，AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與4-氨基安替比林和鐵氰化鉀反應(yīng)紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測定510 nm吸光度增加速率，來計算AKP活性。

自備儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑四：液體×1瓶，4℃避光保存，未變成藍(lán)綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支（EP管中），2 μ mol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存。

粗酶液提取：

1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿，4℃、8000g離心10min，取上清液待測。

2.細(xì)菌或細(xì)胞：按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3.血液可直接測定，或者適當(dāng)稀釋后測定。

測定步驟：

1. 分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到510 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管：取EP管，加入20μL蒸餾水，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入20μL標(biāo)準(zhǔn)品，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5.對照管：取EP管，加入20μL上清液，200μL蒸餾水，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A測定管。

6. 測定管：取EP管，加入20μL上清液，200μL試劑二，200μL試劑三，混勻后置于37℃水浴中保溫15min；加入試劑四600μL，混勻后于510 nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。每個測定管設(shè)一個對照管。

AKP/ALP活性計算：

1.血液中AKP/ALP活力計算

活性單位定義：37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生1μmol酚定義為1個酶活單位。

AKP/ALP活力(μmol/min /mL)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V反總] ÷V樣÷T=6.8×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

2.組織、細(xì)菌或細(xì)胞中AKP/ALP活性計算

（1）按照蛋白濃度計算

活性單位定義：37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 μ mol酚定義為1個酶活單位。

AKP/ALP(μmol/min/mg prot)=[C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V反總]÷(Cpr×V樣)÷T=6.8×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷Cpr

（2）按照樣本質(zhì)量計算

活性單位定義：37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1 μ mol酚定義為1個酶活單位。

AKP/ALP(μmol/min/g 鮮重)=[C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=6.8×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷W

（3）按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計算

活性單位定義：37℃中每104個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1 μ mol酚定義為1個酶活單位。AKP/ALP (μmol/min/104 cell)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V反總]÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T= 6.8×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷細(xì)胞數(shù)量

C標(biāo)準(zhǔn)品：2μmol/mL；V反總：反應(yīng)體系總體積（mL），1020μL=1.02 mL； V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積（mL），0.020mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時間（min），15 min。

注意事項(xiàng)：

1.試劑二、試劑三和試劑四均需避光保存。

2.試劑四變藍(lán)綠色后不能再使用。

3.加入試劑四后必須立即混勻，否則顯色不完全。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

在線咨詢

留言注意事項(xiàng)：

1.遵守中華人民共和國有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。

2.請您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。

3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。

您感興趣的產(chǎn)品*
您的單位*
聯(lián)系人*
聯(lián)系電話*
詳細(xì)地址*
常用郵箱*
請輸入您對我們的意見或建議*
驗(yàn)證碼*

同類產(chǎn)品

訂購流程

訂貨流程

產(chǎn)品訂購說明:

1、報價含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標(biāo)本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測免收代測費(fèi)，一周出結(jié)果。

7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。

8、如因單位財務(wù)制度原因，可申請先發(fā)貨，報賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

賬戶名：上海生物

開戶行：中國銀行山東省分行營業(yè)部

賬號：2169 2341 6278

為方便廣大客戶辦理貨款我公司提供多個銀行的賬戶，學(xué)校、醫(yī)院客戶購買產(chǎn)品如因單位財務(wù)制度原因可先發(fā)貨待報賬后匯款，請及時告知銷售人員已做具體操作。

堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP/ALP）活性測定試劑盒分光光度法50管/24樣

產(chǎn)品目錄

聯(lián)系我們

技術(shù)服務(wù)

商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

在線咨詢

同類產(chǎn)品

訂貨流程

付款方式

堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP/ALP）活性測定試劑盒分光光度法50管/24樣