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結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase,GBSS)試劑盒分光光度法25管/24樣

  • 產(chǎn)品貨號(hào):CS-01S63375
  • 產(chǎn)品價(jià)格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 包裝類(lèi)型:25管/24樣
  • 采購(gòu)熱度:331
  • 庫(kù)存:26
  • CAS號(hào):
  • 方法:分光光度法
  • 含量:
  • 品牌名稱(chēng):莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡(jiǎn)介內(nèi)容:結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase,GBSS)試劑盒質(zhì)量可靠、價(jià)格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)。

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標(biāo)簽:結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase GBSS)試劑盒 

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商品詳情購(gòu)物流程代測(cè)服務(wù)付款方式常見(jiàn)問(wèn)題

 公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠(chǎng)產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買(mǎi)的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱(chēng)

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase,GBSS)試劑盒

分光光度法

25/24

CS-0163375

 注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:

GBSSEC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。

商品介紹:

測(cè)定原理

GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過(guò)反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過(guò)340nm下測(cè)定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。

需自備的的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:25mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入7mL試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入4mL試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入9mL試劑一充分混勻備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑五:液體×1支,-20℃保存;臨用前加入0.5mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

試劑六:粉劑×1支,-20℃保存;臨用前加入0.5mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融;

粗酶液制備

稱(chēng)取0.1~0.2g組織(建議稱(chēng)取約0.1g組織),加入1mL提取液,冰浴中勻漿。10000g ,4℃離心10min,棄上清,在沉淀中加入1mL提取液充分混勻,置冰上待測(cè)。

測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在EP管中按順序加入下列試劑

混勻,30℃保溫30 min,置沸水浴中1 min(蓋緊,防止水分散失),冰浴冷卻,10000g 4℃離心10min,取上清液(如果一次性測(cè)定樣本較多,可將試劑四、五和六按比例配成混合液)

上清液

試劑四

試劑五

試劑六

混勻后立即340 nm波長(zhǎng)下記錄初始吸光度A1 2min后的吸光度A2,計(jì)算ΔA=A2-A1。

注意:試劑二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。

GBSS活性計(jì)算

1、按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

GBSSnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V) ÷T×稀釋倍數(shù)

=529×ΔA÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

2、按照樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。

GBSS活性(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣÷V樣總×W)÷T×稀釋倍數(shù)

=529×ΔA÷W

V 反總:反應(yīng)體系總體積,7.8×10-4 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cmV樣:加入樣本體積,0.15 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;稀釋倍數(shù):1.9;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量。

注意:
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測(cè),標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專(zhuān)人取樣(限省內(nèi)客戶(hù))。

  

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