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標(biāo)簽:甜菜堿(Betaine)含量試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
甜菜堿(Betaine)含量試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63404 |
甜菜堿是一種廣泛分布于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿,是生物體內(nèi)膽堿的氧化產(chǎn)物,可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤,并可作為甲基供體,參與促進(jìn)動(dòng)物蛋白質(zhì)和脂肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用,在化工、醫(yī)藥、食品添加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。
測(cè)定原理
甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀,沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液,在525nm處有特征吸收峰,測(cè)定525nm處的吸光值,可計(jì)算得樣品的甜菜堿含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、乙醚、鹽酸、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體30mL×1瓶 ,4℃保存;
試劑一:粉劑3瓶,4℃保存,臨用前根據(jù)用量配制,每瓶加40mL蒸餾水溶解,加780μL濃鹽酸調(diào)pH為1。
試劑二:99%乙醚,自備。取無(wú)水乙醚99mL,加入蒸餾水1mL,混勻。
試劑三:70%丙酮,自備。(易揮發(fā),根據(jù)用量自備,丙酮:蒸餾水=7:3)。
甜菜堿提取
取烘干后過(guò)40目篩的樣品約0.04g,加1.6mL水,置于60℃提取30min,期間不斷震蕩。再加入400μL提取液,混勻后10000g,25℃,離心10min,取上清液。
測(cè)定操作表
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至525nm。
2、操作表
甜菜堿含量計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 1.004x + 0.0057,R2 = 0.9993;x為甜菜堿濃度(mg/mL),y為吸光值。
甜菜堿含量(mg/g 干重)=(ΔA-0.0057)÷1.004× V標(biāo)準(zhǔn)÷(V樣÷V樣總×W)
=1.99×(ΔA-0.0057)÷W
V標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)品體積,1.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,1.2mL;V樣總:加入提取液體積,2mL;W:樣本質(zhì)量,g
注意事項(xiàng)
1、試劑一配制時(shí)pH嚴(yán)格控制為1,否則會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)不完全,配制后4℃只能穩(wěn)定幾個(gè)小時(shí),配制后盡快使用。
2、試劑二與試劑三對(duì)呼吸道有一定的刺激,請(qǐng)做好防護(hù)工作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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