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| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 幾丁質(zhì)酶（Chitinase）試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01Ｓ63422 |
幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨)，以及真菌類的細胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC
測定原理
幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖，進一步與對二甲氨基苯甲醛產(chǎn)生紅色化合物，在585nm處有特征吸收峰，吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、水浴鍋、離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿，蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存。（若出現(xiàn)結(jié)晶，可80℃左右加熱溶解后使用）
試劑三：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體20mL×1瓶，4℃避光保存。
粗酶液提取
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心20min，取上清，置冰上待測。
2.真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心20min，取上清置于冰上待測。
3.培養(yǎng)液：直接測定。
測定操作表
計算公式
標準曲線：y=0.3088-0.003，R2=0.9995
計算公式：
1、按照樣本重量計算
酶活性定義：37℃條件下，每克組織每小時分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活性單位。
幾丁質(zhì)酶活性（mg/h/g鮮重）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×W) ÷T
=8.096×（ΔA +0.003）÷W
2、按照蛋白質(zhì)濃度計算
酶活定義：37℃條件下，每毫克蛋白每小時分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質(zhì)酶活性（mg/h mg prot）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T
= 8.096×（ΔA +0.003）÷Cpr
3、按細胞數(shù)量計算
酶活定義：37℃條件下，每104個細胞每小時分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mgN-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質(zhì)酶活性（mg/h /104 cell）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)
=8.096×（ΔA +0.003）÷細胞數(shù)量
4、按液體體積計算
酶活定義：37℃條件下，每毫升培養(yǎng)液每小時分解幾丁質(zhì)產(chǎn)生1mg N-乙酰氨基葡萄糖的酶量為一個酶活單位。
幾丁質(zhì)酶活性（mg/h /mL）=（ΔA+0.003）÷0.3088×V反總÷V樣=8.096×（ΔA +0.003）
V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.4mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL
注意事項
1、反應(yīng)結(jié)束后立即進行比色。
2、試劑四有一定的毒性，請操作時做好防護措施。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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產(chǎn)品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
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