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β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關(guān)鍵酶，產(chǎn)物木糖可作為碳源應(yīng)用于微生物發(fā)酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應(yīng)用于造紙工業(yè)，比傳統(tǒng)的漂白法環(huán)保，具有廣泛的應(yīng)用價值。

商品介紹：

測定原理

β-木糖苷酶催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產(chǎn)生對硝基苯酚，對硝基苯酚在405nm處有特征吸收峰，測定405nm光吸收增加速率，可計算β-木糖苷酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃保存。

試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取

1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心20min，取上清待測。

2.細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。

3.液體：直接檢測。

測定操作表

β-木糖苷酶活性計算公式

標準曲線：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x為標準品濃度（μmol/mL），y為吸光值ΔA。

1、按蛋白濃度計算

酶活定義：45℃，pH7.4時每毫克蛋白1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mg prot）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷（V樣×Cpr）÷T×1000

= 11.34×(ΔA -0.0011)÷ Cpr

2、按樣本質(zhì)量計算：

酶活定義：45℃，pH7.4時每克樣品1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性（nmol/min/g 鮮重）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷（V樣÷V樣總×W）÷T×1000= 11.34×(ΔA-0.0011)÷W

3. 按細胞數(shù)量計算：

酶活定義：45℃，pH7.4時每104個細胞1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性（nmol/min/104cell）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣×V樣總÷細胞數(shù)量（萬個）÷T×1000=11.34×(ΔA-0.0011) ÷ 細胞數(shù)量（萬個）

（4）按液體體積計算

酶活定義：45℃，pH7.4時每毫升液體1min內(nèi)催化產(chǎn)生1 nmol對硝基苯酚為一個酶活單位。

β-木糖苷酶活性（nmol/min/ mL）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反總÷V樣÷T×1000

=11.34×(ΔA-0.0011)

V樣總：加入提取液體積，1mL； V反總：反應(yīng)總體積，0.6mL；V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.2mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣品質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時間，20min；1000:1μmol/mL=1000nmol/mL

ΔA控制在0.01-2范圍內(nèi)，若ΔA大于2，可適當減小樣本量。

標準曲線線性范圍為：0.01μmol/mL-0.5μmol/mL。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

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