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糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖，是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一，主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量，分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度，當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原，血糖降低時(shí)，肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此，肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí)，肌糖原不能直接分解成血糖，必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

商品介紹：

測(cè)定原理：

蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原，在強(qiáng)酸性條件下利用蒽酮顯色劑測(cè)定糖原含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、濃硫酸（不允許快遞）和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：0.1mg/mL 的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液 10mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶， 4℃保存；

糖原提取：

1﹑細(xì)胞或細(xì)菌：收集500~1000萬細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；加入0.75mL提取液超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；轉(zhuǎn)移至10mL試管中，95℃水浴20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min振搖試管1次，使充分混勻；取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5ml，混勻，8000g 25℃離心10min，取上清液待測(cè)。

2﹑組織：稱取0.1~0.2g樣品，加入0.75ml提取液充分勻漿；轉(zhuǎn)移至10ml試管中；95℃水浴20min（蓋緊，防止水分散失），隔5min振搖試管1次，使充分混勻；待組織全部溶解后，取出試管冷卻后，用蒸餾水定容到5ml，混勻，8000g 25℃離心10min，取上清液待測(cè)。

步驟和加樣表

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至620nm，蒸餾水調(diào)零。

2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95℃。

3、試劑二工作液的配制：在試劑二中倒入10mL蒸餾水，緩慢倒入40mL濃硫酸，充分溶解混勻后使用；用不完的試劑4℃保存一周；

4、加樣表（在EP管中反應(yīng)）：

混勻，95℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻，于620nm波長(zhǎng)處，以蒸餾水調(diào)零，分別讀取空白管、標(biāo)準(zhǔn)管和測(cè)定管吸光度，分別記為A1、A2和A3。

注意：1、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只要測(cè)一次。

2、如果A3-A1大于2，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

糖原含量的計(jì)算：

1、按照樣本質(zhì)量計(jì)算

糖原（mg/g鮮重）＝1.11×(C標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷（A2-A1)÷W

2、按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算

糖原(mg/mg prot)＝1.11×(C標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷（A2-A1) ÷Cpr

1.11：是此法測(cè)得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數(shù)，即111ug糖原用蒽酮試劑顯色相當(dāng)于100ug葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色；C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.1mg/mL；V1：加入反應(yīng)體系中糖原提取液體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，5mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：最低檢測(cè)限為10ng/g鮮重或0.1ng/ mg prot。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

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糖原含量試劑盒分光光度法50管/48樣

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