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產(chǎn)品名稱	檢測(cè)方法	規(guī)格	貨號(hào)
葡萄糖-6-磷酸(?Glucose -6-phosphate，6PG)含量測(cè)定試劑盒	分光法	50管/24樣	CS-01Ｓ63446

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義：

6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又稱6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物，廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通過(guò)磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸，以繼續(xù)糖酵解的其它步驟；而在戊糖磷酸途徑中，葡萄糖-6-磷酸是其第一個(gè)底物，該過(guò)程也是生成NADPH的主要途徑。此外，葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來(lái)。

商品介紹：

測(cè)定原理：

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色，在450 nm下測(cè)定吸光值。

需自備的儀器和用品：

分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體60 mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體30mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；

試劑三：液體3mL×1瓶， 4℃避光保存。

6PG提?。?/span>

1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）， 8000g，25℃離心10min，取上清待測(cè)。

2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，25℃離心10min，取上清待測(cè)。

3、血清（漿）等液體樣品：直接測(cè)定。

測(cè)定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二的配制：臨用前加入8mL水充分溶解待用，用不完的試劑分裝后-20℃保存；

3、工作液的配制：臨用前按照樣本數(shù)量，按以下比例配制工作液

6PG含量計(jì)算：

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 7.7178x - 0.0016，R2 = 0.997； x為6PG含量（μmol/mL），y為吸光值。

2、按照血清（漿）體積計(jì)算

6PG含量（nmol/mL）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷×V1×1000

=129.6×(△A+0.0016)

3、按照蛋白濃度計(jì)算

6PG含量（nmol/mg prot）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷(V1×Cpr)×1000

=129.6×(△A+0.0016) ÷Cpr

4、按照樣品質(zhì)量計(jì)算

6PG含量（nmol/g鮮重）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷(W ×V1÷V2）×1000

=129.6×(△A+0.0016) ÷W

3、按照細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

6PG含量（nmol/104 cell）= [(△A+0.0016)÷7.7178×V1]÷（500×V1÷V2）×1000

=0.259×(△A+0.0016)

V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.25mL；V2：加入提取液體積，1 mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬(wàn)；1000，μmol到nmol的換算系數(shù)。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

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