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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤中性木聚糖酶(Soil Neutral Xylanase,S-NEX)測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63489 |
木聚糖酶(EC
測定原理
NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算NEX活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋,可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿。
試劑組成和配制
緩沖液:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體25mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。
測定操作表
S-NEX計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.6904x + 0.0058,R2 = 0.9989
酶活定義:50℃,pH6.0條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個(gè)酶活單位。
S-NEX活力(μmol/d/g 土樣)=(△A -0.0058)÷ 1.6904×V反總×103÷ W÷T÷ 150
= 113.58×(△A -0.0058)÷ W
V反總:反應(yīng)總體積,0.6mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事項(xiàng)
1. 保證震蕩反應(yīng)30min,使酶與底物充分接觸。
2. 注意90℃水浴防止爆開,以免改變反應(yīng)體系。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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