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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(Solid-Leucine Aminopeptidase,S- LAP)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63486 |
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
測定原理:
S-LAP分解L-亮氨酰對硝基苯胺生成對硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。
自備用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體65mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;
S-LAP測定步驟:
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至405nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在試劑二瓶中加入30mL試劑一充分溶解(如較難溶解,可60℃水浴加熱約30min促進(jìn)溶解);用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
3、操作表
S-LAP活力單位的計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
S-LAP(μmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷(ε×d)×106÷W÷T=14.8×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-3 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;T:反應(yīng)時間,1h=1/24d; W:樣本質(zhì)量,0.2g。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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