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標簽:H2S含量測定試劑盒
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產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
H2S含量測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/48樣 | CS-01S63504 |
H2S是一種新型氣態(tài)信號分子,存在于腦內的神經遞質,生理濃度的H2S對神經系統海馬的長時程增強功能具有重要的調節(jié)作用,并對自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過程發(fā)揮著重要的病理生理效應。
測定原理
H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對苯二胺和硫酸鐵銨等反應生成亞甲基藍,亞甲基藍在665nm處有最大吸收峰,通過測定其吸光值可計算H2S含量。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體32mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體16mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體16mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:液體2.5mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理
1.組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血清(漿):直接測定
操作表(取2 mL離心管,按照下表操作)
H2S計算公式
標準曲線回歸方程為:y = 0.0044x,R2 = 0.9988
(1)組織樣品
a.按照蛋白濃度計算
H2S(nmol/mg prot)=×V反總÷(V樣×Cpr)=340.9×ΔA÷Cpr
b.按照樣本重量計算
H2S(nmol/g鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)= 340.9×ΔA÷W
(2)液體樣品
H2S(nmol/mL)=×V反總÷V樣= 340.9×ΔA
(3) 細胞
H2S(nmol/104 cell)=×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量(萬個))=340.9×ΔA÷細胞數量(萬個)
V反總:反應總體積,0.9mL;V樣:反應中樣品體積,0.6mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質量,g;Cpr:蛋白濃度,mg/mL
注意事項
最低檢出限為1nmol/mL。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司
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