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2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入0.6mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；加蒸餾水0.4mL，混勻后于25℃，16000rpm離心10min，取上清測定。

3.血清：直接測定。

測定操作

計算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.3635x+0.0205，R2 = 0.9986

1. 按照蛋白含量計算

VB6含量（μg/mg prot）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×Cpr）

= 13.76×（△A - 0.0205）÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

VB6含量（μg/g）=（△A - 0.0205）÷ 0.36359 ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）

= 13.76×（△A - 0.0205）÷ W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算

VB6含量（μg/104 cell）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）

= 13.76×（△A - 0.0205）÷ 細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

VB6含量（μg/mL）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷V樣

=13.76×（△A - 0.0205）

V反總：反應(yīng)總體積，1mL；：V樣：加入樣本體積，0.2mL；V樣總：加入提取液體積，1mL； Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項

1.若測定結(jié)果中吸光值超過1，請將樣本稀釋后進(jìn)行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

2.蛋白濃度較高的樣品，比如動物組織，若顯色完成后有沉淀產(chǎn)生，將樣本稀釋后再測定，在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3.顯色完成后立即進(jìn)行測定。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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