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細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

測定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至500nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑一和試劑二的配制：參見試劑的組成和配制。

3、煮沸樣本的準(zhǔn)備：取500μL樣本至新的EP管中，95℃水浴10min，冷卻至室溫后，8000g 4℃離心10min，取上清作為對照管的煮沸樣本待測。

4、測定操作表

GOD活力單位的計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸方程為y = 2.8348x - 0.0169；x為H2O2標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/mL），y為ΔA。

1、血清（漿）GOD活力的計(jì)算

單位定義：每mL血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個(gè)酶活力單位。

GOD（nmol/min/mL）= (ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷V樣÷T×1000=58.8×(ΔA+0.0169)

2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織GOD活力的計(jì)算

（1）按蛋白濃度計(jì)算

單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個(gè)酶活力單位。

GOD（nmol/min/mg prot）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(V樣×Cpr) ×1000÷T

=58.8×(ΔA+0.0169)÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算

單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個(gè)酶活力單位。

GOD（nmol/min/g鮮重）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(W×V樣÷V樣總) ×1000÷T

=58.8×(ΔA+0.0169)÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位定義：每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2為一個(gè)酶活力單位。

GOD（nmol/min/104 cell）=(ΔA+0.0169) ÷2.8348×V反總÷(500×V樣÷V樣總) ×1000÷T

=0.118×(ΔA+0.0169)

V反總：反應(yīng)體系總體積，0.625mL； V樣：加入樣本體積，0.25mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，15 min； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

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