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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測試劑盒樣本處理及要求
兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒注意事項(xiàng)
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)測試盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
總巰基測定試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63524 |
生物體內(nèi)巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測定蛋白質(zhì)巰基含量。
測定原理
巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品
天平、研缽、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制
試劑一:液體40 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體2 mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品的制備:
1.按照組織質(zhì)量(g):水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2.血清,培養(yǎng)液:稀釋5倍后測定,可取0.1mL樣本,加入0.4mL蒸餾水,混勻,置冰上待測。
操作步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至412nm,雙蒸水調(diào)零。
2、操作表
在1mL玻璃比色皿中加入如下試劑
計(jì)算公式
總巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線:y =3.6222 x- 0.0037,R2 = 1,x為標(biāo)品濃度,單位μmol/mL, y為吸光度ΔA。
1. 組織:
(1)按樣本重量計(jì)算
總巰基含量(μmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×V樣總÷W
=0.276×(ΔA+0.0037)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
總巰基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷3.6222×V樣總÷Cpr
=0.276×(ΔA+0.0037)÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液:
總巰基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷3.6222 ×5×103
=1380×(ΔA+0.0037)
V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;5:血清,培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù);103 :1mmol/L=103μmol/ L
注意事項(xiàng)
最低檢出限為10μmol/L。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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產(chǎn)品訂購說明:
1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
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