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產(chǎn)品名稱	檢測方法	規(guī)格	貨號
總抗氧化能力（Total antioxidant capacity，T-AOC）試劑盒	分光光度法	50管/48樣	CS-01Ｓ63525

注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液，細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

商品介紹：

測定原理

在酸性環(huán)境下，物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍色的Fe2+-TPTZ的能力反映了其總抗氧化能力。

自備實驗用品

可見分光光度計、恒溫水浴鍋、低溫離心機、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液：液體60mL×1瓶，使用前預(yù)冷。

試劑一：液體50mL×1瓶，避光保存。

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體5mL×1瓶，避光保存。

樣品的制備

(1) 血清、血漿、唾液或尿液樣品

血漿（制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃，5000rpm 離心10min，取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定，也可以-80℃凍存（不宜超過30 d）后再測定。

(2) 組織樣品

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，然后10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

(3) 細胞樣品

按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎（功率200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；10000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

操作步驟

混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用)：將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合，使用前預(yù)溫至37℃。

總抗氧化能力計算

1.定義：樣品的抗氧化能力以達到同樣吸光度變化值（△A）所需的標(biāo)準(zhǔn)液離子濃度表示。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.8442x-0.0048，R2=0.9979

2.計算公式：

(1)按蛋白濃度計算

單位定義：每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。

總抗氧化能力（U/mg prot）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000×V樣÷(V樣×Cpr)÷T

=59.228×（△A+0.0048）÷Cpr

(2)按樣品質(zhì)量計算

單位定義：每g樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。

總抗氧化能力（U/g 鮮重）=（△A+0.0048）÷ 0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T

=59.228×（△A+0.0048）÷W

(3)按細胞數(shù)量計算

單位定義：每萬個細胞每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。、

總抗氧化能力（U/104cell）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000×V樣÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T

=59.228×（△A+0.0048）÷ 細胞數(shù)量（萬個）

（4）按液體體積計算

單位定義：每毫升樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個酶活力單位。

總抗氧化能力（U/mL）=（△A+0.0048）÷0.8442×1000÷T

= 59.228×（△A+0.0048）

V樣總：加入提取液體積，1 mL； V樣：反應(yīng)中樣品體積，0.03mL；T：反應(yīng)時間，20min；W：樣品質(zhì)量，g；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL

注意事項

1.試劑二對人體有刺激性，請采取適當(dāng)?shù)姆雷o措施。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴乳膠手套操作。

2.盡量避免使用在酸性條件下呈藍色或接近藍色的試劑，否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。

3.樣品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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