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產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
蔗糖合成酶(分解方向;SS-Ⅰ)試劑盒 | 分光光度法 | 50管/24樣 | CS-01S63546 |
蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫”器官運輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC
測定原理
SS-Ⅰ催化蔗糖和UDP生成游離果糖和UDPG,采用3,5-二硝基水楊酸法測定還原糖的含量來反映酶活性的高低。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、離心機、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰
試劑的組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二: 液體5mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×2支,-20℃保存;臨用前每支加入1.2mL試劑二充分溶解待用,現(xiàn)配現(xiàn)用;試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。
樣品測定的準備:
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至540nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定,(在EP管中依次加入下列試劑):
SS-Ⅰ活性計算
1、標準條件下測定回歸方程為y = 0.0012x - 0.0492;x為標準品濃度(μg/mL),y為ΔA。
2、按照蛋白濃度計算
單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/mg prot)=[ (ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(V樣×Cpr) ÷T
=138.9×(ΔA+0.0492) ÷Cpr
3、按照樣本鮮重計算
單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 還原糖定義為一個酶活力單位。
SS-Ⅰ活性(μg /min/g鮮重) =[(ΔA+0.0492) ÷0.0012×V反總]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T
=138.9×(ΔA+0.0492) ÷W
V反總:反應體系總體積,0.1mL; V樣:加入樣本體積,0.02 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司
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1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。
3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內客戶)。
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