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維生素E（Vitamin E）是一種脂溶性維生素，其水解產(chǎn)物為生育酚，是生物體中最主要的抗氧化劑之一，能阻止不飽和脂肪酸收到過(guò)氧化作用的損傷，維持不飽和脂肪酸細(xì)胞膜的完整性和正常功能，具有延緩衰老、預(yù)防溶血性貧血作用，在醫(yī)藥、化妝品、保健品、食品行業(yè)具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

商品介紹：

測(cè)定原理

VE還原Fe3+為Fe2+，Fe2+與1,10-菲羅啉產(chǎn)生有色絡(luò)合物，在530nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、漩渦震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：液體2mL×1支，4℃保存。

試劑三：液體2mL×1支，4℃保存。

試劑四：液體6mL×1瓶，4℃保存。

樣本處理

1.組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，勻漿后用提取液定至1mL，定至在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測(cè)定。

2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）后在漩渦混勻儀上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測(cè)定。

3.血清：取0.1mL，加0.9mL提取液，漩渦儀混勻上震蕩5min，于25℃，5000g離心10min，取上層測(cè)定。

測(cè)定操作

計(jì)算公式

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.022x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量計(jì)算

VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.022×V反總÷（V樣×Cpr）

= 90.9×（△A -0.0065）÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

VE含量（μg/g 鮮重）= （△A -0.0065）÷ 0.022×V反總÷（V樣×W÷V樣總）

= 90.9×（△A -0.0065）÷ W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.022×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）

= 90.9×（△A -0.0065）÷ 細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計(jì)算

VE含量（μg/mL）=（△A -0.0065）÷ 0.022×V反總÷V樣×10

= 909×（△A -0.0065）

V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g

b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.011x + 0.0065 R2 = 0.9978

1. 按照蛋白含量計(jì)算

VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.011×V反總÷（V樣×Cpr）

= 181.8×（△A -0.0065）÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

VE含量（μg/g 鮮重）= （△A -0.0065）÷0.011×V反總÷（V樣×W÷V樣總）

= 181.8×（△A -0.0065）÷ W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.011×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）

= 181.8×（△A -0.0065）÷ 細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計(jì)算

VE含量（μg/mL）=（△A -0.0065）÷0.011×V反總÷V樣×10

= 1818×（△A -0.0065）

V反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；V樣：加入樣本體積，0.1mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)

1. 若反應(yīng)體系產(chǎn)生沉淀，需要將樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂?，并在?jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

2. 最低檢出限為29.5μg/g。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。

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維生素E（Vitamin E，VE）試劑盒微量法100T/48S

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