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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測試劑盒樣本處理及要求
兔β淀粉樣蛋白1-40elisa檢測試劑盒注意事項(xiàng)
谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)測試盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63814 |
注意:正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測定原理:
在酸性環(huán)境下,還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ的能力反映了總抗氧化能力。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,使用前預(yù)冷。
試劑一:液體15mL×1瓶,避光保存。
試劑二:液體1.5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體1.5mL×1瓶,避光保存。
混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按10:1:1的比例混合,使用前37℃預(yù)溫。
樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿(制備時(shí)可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超過30 d)后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
(3) 細(xì)胞樣品
按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
操作步驟:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至593nm,蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
總抗氧化能力計(jì)算公式:
a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.8442x-0.0048,R2=0.9979
(1)按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/g 鮮重)=(△A+0.0048)÷ 0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=59.228×(△A+0.0048)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T
=59.228×(△A+0.0048)÷Cpr
(3)按細(xì)胞計(jì)算
單位定義:每萬個(gè)細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/104cell)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè)))÷T
= 59.228×(△A+0.0048)÷ 細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))
(4)按液體體積計(jì)算
單位定義:每毫升樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/mL)=(△A+0.0048)÷0.8442×1000÷T
= 59.228×(△A+0.0048)
V樣總:加入提取液體積,1 mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,6μL;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.4221x - 0.0048;R2=0.9979
(1)按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/g 鮮重)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=118.455×(△A+0.0048)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每mg蛋白每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/mg prot)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×Cpr)÷T
=118.455×(△A+0.0048)÷Cpr
(3)按細(xì)胞計(jì)算
單位定義:每萬個(gè)細(xì)胞每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/104cell)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000×V樣÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè)))÷T
= 118.455×(△A+0.0048)÷ 細(xì)胞數(shù)量(萬個(gè))
(3)按液體體積計(jì)算
單位定義:每毫升樣本每分鐘產(chǎn)生1μmolFe2+-TPTZ定義為一個(gè)酶活力單位。
總抗氧化能力(U/mL)=(△A+0.0048)÷0.4221×1000÷T
= 118.455×(△A+0.0048)
V樣總:加入提取液體積,1 mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,6μL;T:反應(yīng)時(shí)間,20min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL
注意事項(xiàng):
1.試劑二對人體有刺激性,請采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作。
2.盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的試劑,否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。
3.樣品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
留言注意事項(xiàng):
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產(chǎn)品訂購說明:
1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請咨詢客服。
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