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標(biāo)簽:蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒
聯(lián)系人:高小姐
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詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
公司上萬種科研產(chǎn)品，主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校，是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān)，確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01Ｓ63804 |
注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過程中的早期標(biāo)志，其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。
測定原理：
羰基與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基苯腙，在370nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器：
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水、無水乙醇、乙酸乙酯。
試劑組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據(jù)樣品數(shù)，每支加1mL水溶解，每支為10個樣品用量）
試劑二：液體6mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑五：根據(jù)測定樣品量，將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
試劑六：液體60mL×1瓶，4℃保存。
樣品處理：
1.組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，于4℃，4000g離心10min，取上清，加入0.1mL試劑一，室溫放置10min，4℃，10000g離心10min，取上清待測。
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.血清等液體樣本：直接測定。
測定步驟和操作表：
1、分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至370nm。
2、操作表
計算公式：
a．用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1.按照樣本蛋白濃度計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mg prot）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(V樣×Cpr) =0.227×ΔA370÷Cpr
2.按照樣本重量計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/g 鮮重）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(W ×V樣÷V樣總) =0.227×ΔA370÷W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/104cell）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(細(xì)胞數(shù)量 ×V樣÷V樣總) =0.227×ΔA370÷細(xì)胞數(shù)量
4.按照液體體積計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mL）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷V樣=0.227×ΔA370
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.3 mL；ε：羰基毫摩爾消光系數(shù)，22 L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.06 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL，W：樣本質(zhì)量，g
b．用96孔板測定的計算公式如下
1. 按照樣本蛋白濃度計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mg prot）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(V樣×Cpr) =0.454×ΔA370÷Cpr
2. 按照樣本重量計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/g 鮮重）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(W ×V樣÷V樣總) =0.454×ΔA370÷W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/104cell）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷(細(xì)胞數(shù)量 ×V樣÷V樣總) =0.454×ΔA370÷細(xì)胞數(shù)量
4. 按照液體體積計算
蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mL）= [ΔA370×V反總÷（ε×d）]÷V樣=0.454×ΔA370
V反總：反應(yīng)體系總體積，0.3 mL；ε：羰基毫摩爾消光系數(shù)，22 L/mmol/cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V樣：加入樣本體積，0.06 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL，W：樣本質(zhì)量，g
注意事項：
1. 試劑一使用前根據(jù)要測定的樣品數(shù)現(xiàn)配，配置好后4℃保存，若變?yōu)楹谏?，則不能使用。
2. 試劑二見光易分解，反應(yīng)需嚴(yán)格避光。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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1、報價含普票、運(yùn)費(fèi)。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。
3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。
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