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產(chǎn)品名稱	檢測方法	規(guī)格	貨號
活性污泥堿性蛋白酶（Solid - Alcalase Protease，S-ALPT）試劑盒	微量法	100管/48樣	CS-01Ｓ63789

注意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質(zhì)以及其他含蛋白質(zhì)氮的有機(jī)化合物的轉(zhuǎn)化，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。S-ALPT在堿性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解，與土壤有機(jī)質(zhì)含量、氮素及其他土壤性質(zhì)有關(guān)。

商品介紹：

測定原理：

堿性條件下，S-ALPT可將酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm有特征吸收峰。

實驗中所需儀器及設(shè)備：

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、雙蒸水

試劑組成和配置：

試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入5ml蒸餾水充分溶解；用不完的試劑4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入50μL試劑七使粉劑潤濕，然后加入10ml試劑一，轉(zhuǎn)入燒杯中沸水浴磁力攪拌溶解后待用；用不完的試劑4℃保存；（可在燒杯上蓋一層保鮮膜，注意觀察，避免水分全部蒸發(fā)，一般加熱15-30分鐘，該試劑為過飽和試劑，充分混勻后仍出現(xiàn)顆粒物不溶物不影響使用）。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入20ml蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存；

試劑五：液體3mL×1瓶，4℃保存；

試劑六：液體1.5mL×1支，50μg/ml標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液，4℃保存；

試劑七：液體1.5mL×1支，4℃保存；

樣品處理：

胞外酶：取1mL樣本，8000g 25℃離心10min，取上清液測定。

胞內(nèi)酶: 取1mL樣本，8000g 25℃離心10min，棄上清，在沉淀中加入1mL蒸餾水，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），8000g 25℃離心10min，取上清液測定。

測定操作：

1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至680nm，蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二、三和四40℃水浴10min。

3、樣本測定：

S-ALPT活性計算：

（1）按樣本體積計算

單位定義：每min每mL樣本產(chǎn)生1μg酪氨酸為一個 S-ALPT活力單位。

S-ALPT(μg/min/mL)=C標(biāo)準(zhǔn)×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管×V反總÷V樣÷T=35×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管

（2）按樣本蛋白濃度計算

單位定義：每min每mg組織蛋白產(chǎn)生1μg酪氨酸為一個 S-ALPT活力單位。

S-ALPT(μg/min/mg prot)=C標(biāo)準(zhǔn)×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管×V反總÷V樣÷T÷Cpr =35×(A測定管-A對照管)÷A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr

C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度， 50μg/mL；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.21mL；T：反應(yīng)時間，30min； V樣：樣本體積，0.01mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL。

注意：

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請咨詢客服。

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

5、如需代為檢測，標(biāo)本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

6、代測免收代測費，一周出結(jié)果。

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