在線訂購 免費訂購熱線:021-59541103 021-60443211
聯系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機:13585831301
Q Q: 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661
公司上萬種科研產品,主要供應各大科研單位和學校,是國內眾多科研單位的供應商。公司嚴把質量關,確保每一個出廠產品質量合格,讓您買的省心,用得放心。
產品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
α-葡萄糖苷酶(α-Glucosidase, α-GC)試劑盒 | 微量法 | 100管/48樣 | CS-01S63767 |
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
α-GC(EC
測定原理:
α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入12mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至400nm,蒸餾水調零。
2、加樣表
α-GC活力計算:
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.00585x -0.0027;x為標準品濃度(nmol/mL),y為吸光值。
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T
=56.98×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/g鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00585×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=56.98×(ΔA+0.0027) ÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.00585×V反總]÷(500×V樣÷V樣總)÷T
=0.114×(ΔA +0.0027)
V反總:反應體系總體積,0.3mL;V樣:加入反應體系中樣本體積,0.03mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g; 500:細胞或細菌總數,500萬;T:反應時間,30min。
b.用96孔板測定的計算公式如下
標準條件下測定的回歸方程為y = 0.0039x -0.0027;x為標準品濃度(nmol/mL),y為吸光值。
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T
=85.47×(ΔA+0.0027) ÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/g鮮重)=[(ΔA+0.0027)÷0.0039×V反總]÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=85.47×(ΔA+0.0027) ÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘產生1nmol對-硝基苯酚定義為一個酶活性單位。
α-GC活性(nmol/min/104cell) =[(ΔA+0.0027) ÷0.0039×V反總]÷(500×V樣÷V樣總)÷T
=0.171×(ΔA +0.0027)
V反總:反應體系總體積,0.3mL;V樣:加入反應體系中樣本體積,0.03mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g; 500:細胞或細菌總數,500萬;T:反應時間,30min。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術有限公司
留言注意事項:
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規(guī),尊重網上道德,承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經本站同意,任何人不得利用本留言簿發(fā)布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。
您感興趣的產品* | |
您的單位* | |
聯系人* | |
聯系電話* | |
詳細地址* | |
常用郵箱* | |
請輸入您對我們的意見或建議* | |
驗證碼* | |
產品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴格的產品當天可發(fā)貨。
3、進口原裝產品要3-6周的貨期,詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測,標本對環(huán)境溫度高,可聯系客服安排專人取樣(限省內客戶)。
6、代測免收代測費,一周出結果。
7、產品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收,做退回。我們將在24小時之內為您補發(fā) 損壞產品。
8、如因單位財務制度原因,可申請先發(fā)貨,報賬后付款(此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好客戶)。
普票匯款信息
賬 戶 名:上海生物
開 戶 行:中國銀行山東省分行營業(yè)部
賬 號:2169 2341 6278