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標(biāo)簽:β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase β-GD)試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
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公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠(chǎng)產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買(mǎi)的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-glucuronidase,β-GD)試劑盒 | 微量法 | 100管/96樣 | CS-01S63762 |
注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
β-GD廣泛存在于動(dòng)物組織中,是一種參與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程的基質(zhì)降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。該酶在肝細(xì)胞中含量較高。此外在胃癌組織中含量豐富,測(cè)定胃液β-GD活性對(duì)于研究胃癌具有重要的意義。
測(cè)定原理
β-GD催化苯酚 β-D-葡萄糖醛酸產(chǎn)生游離的酚酞,通過(guò)測(cè)定苯酚含量反應(yīng)該酶活性高低。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體2mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL蒸餾水,充分溶解待用;用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10mL,4℃保存;
樣品測(cè)定的前處理
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測(cè)定
β-GD活性計(jì)算
(1)按樣本鮮重計(jì)算:
單位定義:每小時(shí)每g鮮重樣品中催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個(gè)活力單位。
β-GD(μmol/h/g 鮮重)= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=2×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位定義:每小時(shí)每mg組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol酚酞的量為一個(gè)活力單位。
β-GD(μmol/h/mg prot)= (C標(biāo)準(zhǔn)管×V1)×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=2×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度, 1μmol/mL;V1:加入樣本體積:0.01mL;V2:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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