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單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒微量法100T/96S

  • 產(chǎn)品貨號(hào):CS-01S63753
  • 產(chǎn)品價(jià)格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 包裝類型:100T/96S
  • 采購(gòu)熱度:273
  • 庫存:100
  • CAS號(hào):
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡(jiǎn)介內(nèi)容:?jiǎn)伟费趸福∕onoamine Oxidase,MAO)試劑盒質(zhì)量可靠、價(jià)格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)。

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標(biāo)簽:單胺氧化酶(Monoamine Oxidase MAO)試劑盒 

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產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)試劑盒

微量法

100T/96S

CS-0163753

   注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎動(dòng)物的各種器官,特別是分泌腺、腦、肝臟,在無脊椎動(dòng)物、豆類的芽等植物中也存在催化單胺類物質(zhì)代謝,含量較低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纖維化的程度。此外,MAO活性異常導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)出現(xiàn)紊亂,從而引發(fā)多種病癥。

商品介紹:

測(cè)定原理:

MAO催化單胺類底物脫氨生成相應(yīng)的醛,進(jìn)一步氧化成酸;底物在360nm處有特征吸收峰,測(cè)定360nm光吸收下降的速率,計(jì)算MAO活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

提取液二:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1管,4℃避光保存。

粗酶液提取:

1.稱取約0.1g樣品,加1 mL預(yù)冷的提取液一充分冰浴勻漿,1000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測(cè)定)。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后10000g,4℃,離心10min,棄沉淀;把上清轉(zhuǎn)移到另一預(yù)冷的離心管,10000g,4℃,離心30min,棄上清;加入1.0 mL預(yù)冷的提取液二,震蕩混勻,16000g,4℃,離心40min,棄上清;沉淀加入預(yù)冷的1.0 mL 試劑一,震蕩混勻,即粗酶液(可用于可溶性蛋白濃度測(cè)定),取上清置于冰上待測(cè)。

3.血清:直接測(cè)定。

測(cè)定操作表:

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至360nm

2、操作表

MAO活性計(jì)算公式:

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、按蛋白含量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每毫克蛋白質(zhì)1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 114×ΔA÷Cpr

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每克樣品1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 114×ΔA÷ W

3、按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T

= 114×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量

4、按照液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每升血清1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L=×V反總÷V=114×ΔA

ε:底物摩爾消光系數(shù),1460L /mol /cmd:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;T:反應(yīng)時(shí)間,60min,W:樣本質(zhì)量,g

a.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、按蛋白含量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每毫克蛋白質(zhì)1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1 nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / mg prot= ×V反總÷(V樣× Cpr)÷T= 228×ΔA÷Cpr

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每克樣品1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / g 鮮重)=×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T = 228×ΔA÷ W

3、按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每104個(gè)細(xì)胞1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min / 104 cell= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T

= 228×ΔA÷細(xì)胞數(shù)量

4、按照液體體積計(jì)算

酶活定義:37℃,pH7.6時(shí),每升血清1min內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol底物的酶量為一個(gè)酶活單位。

DAO活性(nmol/min /L=×V反總÷V=228000×ΔA

ε:底物摩爾消光系數(shù),1460L /mol /cm; d96孔板光徑,0.5cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液體積,1mLCpr:樣本蛋白濃度,mg/mLT:反應(yīng)時(shí)間,60min,W:樣本質(zhì)量,g

注意事項(xiàng):

1、吸光度變化應(yīng)該控制在0.010.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計(jì)算公式中參與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。

2、樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定。

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

2、常用試劑備貨充足,除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

  

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

  

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測(cè),標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。

  

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