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公司上萬種科研產(chǎn)品，主要供應各大科研單位和學校，是國內(nèi)眾多科研單位的供應商。公司嚴把質(zhì)量關，確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格，讓您買的省心，用得放心。
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 漆酶（Laccase）試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01Ｓ63750 |
注意：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
漆酶（CE
測定原理
漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存。
工作液：粉劑×1瓶，4℃避光保存，臨用前加15mL試劑一溶解；用不完的試劑4℃保存一周。
酶液提取
1．組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心30min，取上清，置冰上待測。
2．細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置于冰上待測。
3．細胞培養(yǎng)液：直接檢測。
測定操作表
注意：
1、極少數(shù)樣本在60℃水浴20min后會出現(xiàn)沉淀，可經(jīng)過8000g 25℃離心10min后，取上清檢測，例如成熟的水稻葉片樣本。
2、為確保檢測準確性，若ΔA大于1，將樣本用提取液稀釋2~10倍后重新檢測，計算公式乘以相應稀釋倍數(shù)。
酶活性計算公式
a．用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1．按照蛋白濃度計算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 9.26×△A÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 9.26×△A÷W
3．按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /104 cell）= ×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）÷T= 9.26×△A÷細胞數(shù)量
4．按照液體體積計算
酶活性定義：每升培養(yǎng)液每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /L）= ×V反總÷V樣÷T= 9260×△A
ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應總體積，0.3mL；V樣：反應體系中樣本體積，0.03mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，20min
b. 用96孔板測定的計算公式如下
1．按照蛋白濃度計算
酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /mg prot）= ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T= 18.52×△A÷Cpr
2．按照樣本質(zhì)量計算
酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 18.52×△A÷W
3．按照細胞數(shù)量計算
酶活性定義：每104個細胞每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /104 cell）= ×V反總÷（V樣×細胞數(shù)量÷V樣總）÷T
= 18.52×△A÷細胞數(shù)量
4．按照液體體積計算
酶活性定義：每升培養(yǎng)液每分鐘氧化1nmol底物ABTS所需的酶量為一個酶活力單位。
漆酶活性（nmol/min /L）= ×V反總÷V樣÷T= 18520×△A
ε：ABTS毫摩爾消光系數(shù)：36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V反總：反應總體積，0.3mL；V樣：反應中樣本體積，0.045mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應時間，20min
木質(zhì)素（Lignin）含量試劑盒說明書
微量法 100管/96樣
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作用。
測定原理
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?；笤?/span>280nm處有特征吸收峰，280nm的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關。
需自備的儀器和用品、
天平、40目篩，玻璃試管、燒杯、離心機，恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸，濃硫酸。
試劑組成和配制
取200μL于微量石英比色皿/96孔板，測定280nm處吸光值A。分別記為A空白管和A測定管，ΔA=A測定管-A空白管
計算公式
標準曲線：y = 0.0347x+0.0068，R2=0.9889
Lignin（mg/g干重）= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反總×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50
V反總：反應總體積：1.02mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)
注意事項
1.試劑一有毒性，請操作時做好防護措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。
2.加熱過程中有劇烈反應，震蕩時輕搖，以免壓力過大噴出造成人身傷害。
3.試劑三具有強刺激性，建議操作過程全部在通風櫥子操作。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康，請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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