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標(biāo)簽:植物全磷含量測(cè)定
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
小鼠糖皮質(zhì)激素受體αelisa檢測(cè)試劑盒樣本處理及要求
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非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)ELISA試劑盒樣本處理及要求
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買(mǎi)的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
植物全磷含量測(cè)定 | 微量法 | 100T/96S | CS-01S63741 |
注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
磷的存在形態(tài)包括無(wú)機(jī)磷與有機(jī)磷。無(wú)機(jī)磷主要指磷酸根,參與生物體內(nèi)多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質(zhì)磷酸化和脫磷酸化等。通過(guò)測(cè)定總磷與無(wú)機(jī)磷含量即可了解作物對(duì)磷的利用率,進(jìn)而為合理施肥提供依據(jù)。
測(cè)定原理:
植株樣品用硫酸-過(guò)氧化氫消化,使各種形態(tài)磷轉(zhuǎn)變成正磷酸鹽,正磷酸鹽與鉬銻抗顯色劑反應(yīng),生產(chǎn)磷鉬藍(lán),藍(lán)色溶液的吸光度與含磷量呈正比例關(guān)系,用酶標(biāo)儀測(cè)定。
自備儀器和用品:
石墨消解儀、離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸。
試劑組成和配置:
試劑一:液體 50ml
試劑二:液體 5ml
試劑三:粉劑×1支,4℃避光保存。臨用前加0.2mL蒸餾水溶解。
試劑四:液體0.4mL×1支,4℃保存。
工作液:臨用前將試劑三和試劑四混合,加19.4mL蒸餾水混勻。(提供20mL棕色空瓶)
樣本消化:
1.將植物樣本80℃烘干至恒重后粉碎,過(guò)40目篩,稱(chēng)取約0.3g,加入消化管中,同時(shí)取空消化管兩支,用移液管分別往每管中加入10mL濃硫酸,輕輕晃動(dòng)消化管。
2.將20支消化管全部置于石墨消解儀上,蓋好蓋子,打開(kāi)廢氣回收系統(tǒng)以及石墨消解儀,溫度設(shè)置為:曲線加熱100℃,10min;280℃,10min;400℃,40min。
3.將消化管冷卻至室溫,切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入1mL試劑二,搖勻,重新放置在石墨消解儀上,溫度設(shè)置為:曲線加熱200℃,10min;320℃,10min;400℃,30min。
4.取出消化管冷卻至室溫,切勿在樣品冷卻之前開(kāi)蓋。每支消化管中緩慢加入0.5mL試劑二,搖勻,重新放置在石墨消解儀上,溫度設(shè)置為:曲線加熱200℃,10min;320℃,10min;400℃,30min。若樣本未呈現(xiàn)澄清狀態(tài),應(yīng)重復(fù)步驟4至澄清,即消解完全。
5.關(guān)閉石墨消解儀,待樣品冷卻后關(guān)掉廢氣回收系統(tǒng)。
6.取2mLEP管,每個(gè)加900uL蒸餾水,再加100uL消解液混勻后,再加試劑一500uL,混勻后待測(cè)。
測(cè)定操作表
計(jì)算公式
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.1476x -0.0011,R2 = 0.9983(x為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度,μmol/mL;y為吸光值A)
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷ 2.1476×V總÷W×10-3×31
= 1.443×(△A+0.0011)÷W
V總:加入提取液體積,100mL,W:樣本質(zhì)量,g
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.0738x -0.0011,R2 = 0.9983;(x為標(biāo)準(zhǔn)磷濃度,μmol/mL;y為吸光值A)
全磷含量(g/kg)=(△A+0.0011)÷ 1.0738×V總÷W×10-3×31
= 2.887×(△A+0.0011)÷W
注意事項(xiàng)
1.配好的試劑3天內(nèi)使用完。
2.最低檢出限為11mg/Kg。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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