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標(biāo)簽:非蛋白巰基測(cè)定試劑盒
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人增殖誘導(dǎo)配體酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
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公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱 | 檢測(cè)方法 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
非蛋白巰基測(cè)定試劑盒 | 微量法 | 100T/48S | CS-01S63679 |
注意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。
測(cè)定原理:
巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100 mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體18 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體1mL×1管,4℃避光保存。
樣品的制備:
1.按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2.血清,培養(yǎng)液:取0.1mL樣本,加入0.4mL提取液,混勻,室溫靜置10min, 然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
操作步驟:
1、酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至412nm。
2、操作表
在96孔板中加入如下試劑
圖
計(jì)算公式:
非蛋白巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.8111x - 0.0037,R2 = 1,x為標(biāo)品濃度,單位μmol/mL,y為吸光度ΔA。
1. 組織:
(1)按樣本重量計(jì)算
非蛋白巰基含量(μmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷W
=0.552×(ΔA+0.0037)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
非蛋白巰基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷Cpr
=0.552×(ΔA+0.0037)÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液:
非蛋白巰基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×5×103
=2761×(ΔA+0.0037)
V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;5:血清,培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù);103 :1mmol/ L=103μmol/ L
注意事項(xiàng)
最低檢出限為10μmol/L。
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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