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脫氫抗壞血酸(dehydroascorbate,DHA)含量測定試劑盒微量法100T/96S

  • 產(chǎn)品貨號:CS-01S63612
  • 產(chǎn)品價格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:100T/96S
  • 采購熱度:280
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:脫氫抗壞血酸(dehydroascorbate,DHA)含量測定試劑盒質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標(biāo)簽:脫氫抗壞血酸(dehydroascorbate DHA)含量測定試劑盒 

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商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

 公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

脫氫抗壞血酸(dehydroascorbate,DHA)含量測定試劑盒

微量法

100T/96S

CS-0163612

   注意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

AsA作為植物細(xì)胞一個重要生理指標(biāo),其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHAAsA的可逆的氧化型,在生物體內(nèi),與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng),具有電子受體的作用。

商品介紹:

測定原理:

DTT還原DHA生成AsA,通過測定體系中AsA的生成速率,即可計算出DHA含量。

自備儀器和用品:

低溫離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體100 mL×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體16mL×1瓶,室溫保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水充分溶解。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶, 4℃保存。臨用前加入5.743 mL蒸餾水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸餾水,混勻,即為100μmol/L DHA。

樣品中DHA提?。?/span>

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。12000g4℃離心20min,取上清置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);12000g,4℃離心10min,取上清液置于冰上待測。

3. 血清等液體:直接測定。

DHA測定操作:

1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到265 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液、160μL預(yù)熱的試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s130s的吸光值A1A2,△A空白管=A2-A1

4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL預(yù)熱的試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s130s的吸光值A3A4,△A測定管=A4-A3。

注意:標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。

計算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

DHA(nmol/mg prot) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(Cpr×V樣)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

DHA(nmol/g 鮮重) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(W×V樣÷V樣總)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷W

(3). 按細(xì)胞數(shù)量計算

DHA(nmol/104 cell) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(W×V樣÷V樣總)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷細(xì)胞數(shù)量

4)按液體體積計算

DHA(nmol/mL) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷V

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)液:100μmol/LV樣總:上清液總體積,1.0 mL=1 ×10-3 L;V標(biāo)準(zhǔn):加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.02mL;V樣:加入樣本體積,0.02mL;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mLW:樣品質(zhì)量(g)。

b.使用96孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

DHA(nmol/mg prot) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(Cpr×V樣)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

DHA(nmol/g 鮮重) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(W×V樣÷V樣總)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷W

(3). 按細(xì)胞數(shù)量計算

DHA(nmol/104 cell) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷(W×V樣÷V樣總)

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷細(xì)胞數(shù)量

4)按液體體積計算

DHA(nmol/mL) =[C標(biāo)準(zhǔn)液×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管×V標(biāo)準(zhǔn)]÷V

=100×△A測定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)液:100μmol/L;V樣總:上清液總體積,1.0 mL=1×10-3 LV標(biāo)準(zhǔn):加入標(biāo)準(zhǔn)品體積,0.02mL;V樣:加入樣本體積,0.02mL;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量(g)。

注意事項:

1.臨用前配制的試劑未使用完的4℃保存,3天內(nèi)使用完。

2.最低檢出限為10μmol/L。

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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2、常用試劑備貨充足,除對溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

  

3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期,詳細(xì)情況請咨詢客服。

  

4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測,標(biāo)本對環(huán)境溫度高,可聯(lián)系客服安排專人取樣(限省內(nèi)客戶)。

  

6、代測免收代測費,一周出結(jié)果。

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