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硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)活性測定試劑盒微量法100T/96S

  • 產(chǎn)品貨號:CS-01S63597
  • 產(chǎn)品價格:電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:100T/96S
  • 采購熱度:296
  • 庫存:100
  • CAS號:
  • 方法:微量法
  • 含量:
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式:
  • 分子量:

簡介內(nèi)容:硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)活性測定試劑盒質(zhì)量可靠、價格優(yōu)惠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點。

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標簽:硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)活性測定試劑盒 

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商品詳情購物流程代測服務(wù)付款方式常見問題

 公司上萬種科研產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴把質(zhì)量關(guān),確保每一個出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。

產(chǎn)品名稱

檢測方法

規(guī)格

貨號

硫氧還蛋白過氧化物酶(TPX)活性測定試劑盒

微量法

100T/96S

CS-0163597

 注意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:

TPX屬于過氧化物酶家族,在體內(nèi)主要通過還原過氧化氫和一些氫過氧化物來實現(xiàn)抗氧化作用,功能與GPX類似,也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。TPX普遍存在于各種生物體內(nèi),如酵母、植物、動物、原生動物、寄生蟲、細菌和古細菌,在進化上高度保守。TPX與細胞增殖、分化、細胞凋亡及腫瘤發(fā)生調(diào)控密切相關(guān)。TPX的主要功能包括細胞脫毒、抗氧化和調(diào)節(jié)由過氧化氫介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和免疫反應(yīng)。

商品介紹:

測定原理:

TPX催化H2O2氧化二硫蘇糖醇(DTT),H2O2的吸收波長為240nm,通過測定240nm吸光度的下降速率,即可計算出TPX活性。

自備儀器和用品:

低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、和蒸餾水

試劑組成和配制:

試劑一:液體120mL×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體20mL×1瓶,- 20℃保存。

試劑三:液體2mL×1支,4℃。

粗酶液提?。?/span>

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。

2.細菌、真菌:按照細胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3.血清等液體:直接測定。

TPX測定操作:

取微量石英比色皿或96孔板,加入4 μL上清液,180 μL試劑二,16 μL試劑三,迅速混勻后于240 nm測定10s130s吸光度,記為A1A2

TPX活性計算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPXnmol/min /mg prot=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(Cpr×V樣)÷T

=573×(A1A2)÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每克樣本每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min/g 鮮重)=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=573×(A1A2)÷W

3)按細胞數(shù)量計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每104個細胞每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min/104 cell=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(細胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=573×(A1A2)÷細胞數(shù)量

4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每毫升液體每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min /mL=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷V樣÷T

=573×(A1A2)

ε:H2O2的摩爾消光系數(shù),43600 L/mol/cm=0.0436 L/μmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)體系總體積(L),200 μ L=2×10-4 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL);W :樣品質(zhì)量;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(mL),4 μL=4×10-3 mL;V樣總:提取液體積,1 mLT:反應(yīng)時間(min),2min。

b.使用96孔板測定的計算公式如下

(1). 按蛋白濃度計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每毫克蛋白每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min /mg prot=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(Cpr×V樣)÷T

=1146×(A1A2)÷Cpr

(2). 按樣本質(zhì)量計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每克樣本每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min/g 鮮重)=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1146×(A1A2)÷W

3)按細胞數(shù)量計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每104個細胞每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min/104 cell=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷(細胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1146×(A1A2)÷細胞數(shù)量

4)按液體體積計算

活性單位定義:25℃或者37℃中,每毫升液體每分鐘催化1nmol H2O2降解為1個酶活單位。

TPX活性(nmol/min /mL=(A1A2)÷ε÷d×V反總÷V樣÷T

=1146×(A1A2)

ε:H2O2的摩爾消光系數(shù),43600 L/mol/cm=0.0436 L/μmol/cmd96孔板光徑,0.5cmV反總:反應(yīng)體系總體積(L),200 μL=2×10-4 LCpr:上清液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL);W :樣品質(zhì)量;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(mL),4 μ L=4×10-3 mLV樣總:提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間(min),2min。

注意:

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。
2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司

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