13585831301
021-59541103 021-60443211
3004967995
13585831301021-59541103 021-604432113004967995
在線訂購 免費訂購熱線：021-59541103 021-60443211
聯(lián)系人:高小姐
電話:021-59541103 021-60443211
手機:13585831301
Q Q： 3004967995
Email:3004967995@qq.com
詳細地址：上海市嘉定區(qū)澄瀏公路52號中科院技術轉(zhuǎn)移中心24號樓
| 產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 細胞色素b5（Cytochrome b5）含量測定試劑盒 | 微量法 | 100T/96S | CS-01Ｓ63563 |
細胞色素P450酶是一組主要存在于肝臟的同工酶，在外源物質(zhì)代謝中具有重要作用，尤其是藥物和毒物的代謝。細胞色素P450和細胞色素b5是P450酶系的兩個血紅素蛋白，其比值的變化與P450代謝活性密切相關。
測定原理：
氧化型細胞色素b5經(jīng)連二亞硫酸鈉還原后，在424nm處有最大吸收峰，通過測定424nm和490nm處吸光值的差異，即可計算出細胞色素b5的含量。
自備儀器和用品：
普通離心機，超速離心機、可調(diào)式移液槍、紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：粉劑×2瓶，4℃保存。臨用前各加100mL蒸餾水，充分溶解。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。
工作液配制：臨用前配制，戴一次性手套，小心打開試劑三瓶蓋，加試劑二20mL充分溶解，4℃避光可保存1周。
樣品中細胞色素b5提?。?/span>
1、除去細胞核，線粒體等大分子物質(zhì)：稱約0.5g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10 000g 4℃離心30min，取上清液，轉(zhuǎn)入超速離心管中。
2、粗制微粒體：100 000g，4℃離心60min，棄上清液。
3、除血紅蛋白等雜質(zhì)：向步驟2的沉淀中加1mL試劑一，蓋緊后充分震蕩溶解，100 000g離心30min，棄上清液。
4、待測液：向步驟3的沉淀中加試劑二0.5mL，蓋緊后充分震蕩溶解，即待測液，該待測液需當天測定。
細胞色素b5含量測定操作：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min。
2. 工作液置于25℃水浴中預熱30 min。
3. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入10 μL蒸餾水，200μL工作液，室溫靜置2 min，424nm和490nm處吸光值，424nm處吸光值記為A空白管1，490nm處吸光值記為A空白管2?！?/span>A空白管= A空白管1- A空白管2
4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入10 μL待測液，200μL工作液，室溫靜置2 min，424nm和490nm處吸光值，424nm處吸光值記為A測定管1，490nm處吸光值記為A測定管2。
△A測定管= A測定管1- A測定管2。
注意：只需要做一個空白管。
樣品細胞色素b5含量計算公式：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
細胞色素b5含量(nmol/mg prot) = (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總÷（Cpr×V樣）
= 122.8×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算
細胞色素b5含量（nmol/g 鮮重）= (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總×（V樣總÷V樣）÷W
= 61.4×(△A測定管-△A空白管)÷W
ε：還原型細胞色素b5納摩爾消光系數(shù)，171×10-6 L/nmol/cm；d：比色皿光徑（cm），1cm； V反總：反應體系總體積，210 μL =2.1×10-4 L；Cpr：待測液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定；V樣：加入反應體系中待測液體積，10 μL=0.01 mL；V樣總：待測液總體積，0.5 mL；W：樣品質(zhì)量（g）。
b.使用96孔板測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
細胞色素b5含量(nmol/mg prot) = (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總÷（Cpr×V樣）
= 245.6×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算
細胞色素b5含量（nmol/g 鮮重）= (△A測定管-△A空白管)÷(ε×d)×V反總×（V樣總÷V樣）÷W
= 122.8×(△A測定管-△A空白管)÷W
ε：還原型細胞色素b5納摩爾消光系數(shù)，171×10-6 L/nmol/cm；d：96孔板光徑（cm），0.5cm； V反總：反應體系總體積，210 μL =2.1×10-4 L；Cpr：待測液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定；V樣：加入反應體系中待測液體積，10 μL=0.01 mL；V樣總：待測液總體積，0.5 mL；W：樣品質(zhì)量（g）。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司
留言注意事項：
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產(chǎn)品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個人或團體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。
| 您感興趣的產(chǎn)品* | |
| 您的單位* | |
| 聯(lián)系人* | |
| 聯(lián)系電話* | |
| 詳細地址* | |
| 常用郵箱* | |
| 請輸入您對我們的意見或建議* | |
| 驗證碼* | |
 |
產(chǎn)品訂購說明:
1、報價含普票、運費。
2、常用試劑備貨充足，除對溫度要求極其嚴格的產(chǎn)品當天可發(fā)貨。
3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。
4、訂貨時間為工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代為檢測，標本對環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。
6、代測免收代測費，一周出結果。
7、產(chǎn)品因運輸途中包裝破損請拒絕簽收，做退回。我們將在24小時之內(nèi)為您補發(fā) 損壞產(chǎn)品。
8、如因單位財務制度原因，可申請先發(fā)貨，報賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學校信譽良好客戶）。
普票匯款信息
賬 戶 名：上海生物
開 戶 行：中國銀行山東省分行營業(yè)部
賬 號：2169 2341 6278
關于莼試
產(chǎn)品訂購
新手指南
幫助中心