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標(biāo)簽:8%-16%梯度預(yù)制膠 12孔 1盒(10塊)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
8%-16%梯度預(yù)制膠,12孔 | Precast Protein Gels, 8%-16%, 12 wells | 1盒(10塊) | CS-01F99249 |
本品通過pH中性緩沖液制備,丙烯酰胺與甲叉丙烯酰胺配比是29:1,其規(guī)格為濃縮膠5%,分離膠8-16%,膠板尺寸10×8cm,凝膠厚度1 mm,12孔梳齒,單孔最大上樣量25 µl。電泳及轉(zhuǎn)膜緩沖液使用傳統(tǒng)的tris-glycine緩沖液,蛋白條帶直且尖銳。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini膠電泳槽及其他任何膠板寬度在10 cm的電泳槽。
蛋白電泳經(jīng)常使用聚丙烯酰胺凝膠來實(shí)現(xiàn)蛋白分離,此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成,前者起到將蛋白樣品進(jìn)行濃縮的作用,后者則是根據(jù)凝膠所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交聯(lián)劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質(zhì)。與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室自行配制凝膠相比,使用預(yù)制膠具有以下優(yōu)點(diǎn):1)即開即用,不用再配制N種溶液、灌膠、等膠凝固,節(jié)省了寶貴的時(shí)間和精力;2)不用接觸幾種具有積累性神經(jīng)毒性的試劑(丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺:神經(jīng)毒性和遺傳毒性;TEMED:強(qiáng)神經(jīng)毒;過硫酸銨:可嚴(yán)重?fù)p傷呼吸道,眼睛,皮膚);3)大規(guī)模生產(chǎn),膠與膠之間重復(fù)性好,質(zhì)量穩(wěn)定,不像手工灌膠那樣結(jié)果差異大。 使用方法 1)剪開包裝取出膠,撕去膠板底端橙色膠紙,將預(yù)制膠固定在電泳槽中,加入電泳緩沖液沒過梳齒部位,雙手按住梳子左右部位將其平穩(wěn)緩慢(一定要慢,否則會(huì)將膠齒拔斷或拔歪)拔出,在前后板的上方中央卡上一個(gè)“V”型卡(通過加固前后板,不僅可防止槍頭上樣用力過猛撬開兩板產(chǎn)生縫隙,還可穩(wěn)定跑膠質(zhì)量,電泳過程中“V”型卡不可取出),上樣后進(jìn)行電泳,電泳后取出膠板,用鑷子或小螺絲刀沿左右兩板間的縫隙將兩板別開,將膠取出,棄去塑料板。 2)電泳:使用《分子克隆》指定的tris-glycine電泳緩沖液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%),也可使用我司的Western Blot電泳電轉(zhuǎn)通用緩沖液(SY0360)。推薦使用低壓100V,15min換高壓150V跑至電泳結(jié)束。 3)轉(zhuǎn)膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 電轉(zhuǎn)緩沖液(含 20%甲醇或乙醇),操作與實(shí)驗(yàn)室原有操作完全相同。也可以使用我司的Western Blot電泳電轉(zhuǎn)通用緩沖液(SY0360),無需添加甲醇,無需冰浴,但是需要另行添加20%乙醇,恒壓80V電轉(zhuǎn)60 min。 |
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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