• 13585831301
  • 021-59541103 021-60443211
  • 3004967995

植物蛋白裂解液

  • 產(chǎn)品貨號(hào)：CS-01F98653
  • 產(chǎn)品價(jià)格：電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地：國(guó)產(chǎn)
  • 包裝類型:盒裝
  • 采購(gòu)熱度：188
  • 庫(kù)存：100
  • CAS號(hào)：
  • 方法：
  • 含量：10次
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡(jiǎn)介內(nèi)容：植物蛋白裂解液現(xiàn)貨供應(yīng)，價(jià)格實(shí)惠。

在線訂購(gòu)  免費(fèi)訂購(gòu)熱線：021-59541103 021-60443211

標(biāo)簽:植物蛋白裂解液 10次 

產(chǎn)品目錄

聯(lián)系我們

聯(lián)系人:高小姐

電話:021-59541103 021-60443211

手機(jī):13585831301

Q Q： 3004967995

Email:3004967995@qq.com

詳細(xì)地址：上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

商品詳情購(gòu)物流程代測(cè)服務(wù)付款方式常見問(wèn)題

 產(chǎn)品屬性： 

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

貨號(hào)

植物蛋白裂解液

Plant Total Protein Lysis Buffer

10次

CS-01F98653

介紹

 

 本制品采用低濃度的緩沖體系和特殊的添加劑，使樣品快速充分破裂，從而釋放蛋白質(zhì)，內(nèi)含作用烈的蛋白酶抑制劑，從而保證了蛋白的活性和完整性，同時(shí)去除酚和糖類物質(zhì)。本產(chǎn)品由裂解液和蛋白酶抑制劑組成。

保存：溶液A置于4℃，溶液B、液體C置于-20℃，有效期兩年。

操作步驟：

根據(jù)樣品重量（按照1g新鮮或0.2g的干燥的植物樣品加入3mL溶液A、30μL溶液B和30μL溶液C的比例混合裂解液），先將混合后的裂解液靜置于冰上。

將樣品放在研缽中用液氮充分研磨，研磨完畢后加入裂解液，冰上靜置（3～4小時(shí)），在這期間取出在渦旋振蕩器上振蕩3～4次，每次30sec。

轉(zhuǎn)置冷凍離心機(jī)于4℃，12000rpm（12830g）離心20min，取上清，分裝凍存。
樣品制備完成后進(jìn)行SDS-PAGE電泳分析及后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說(shuō)了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻  
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過(guò)夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無(wú)水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過(guò)程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過(guò)TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。產(chǎn)品僅用于科研
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無(wú)色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

在線咨詢

留言注意事項(xiàng)：

1.遵守中華人民共和國(guó)有關(guān)法律、法規(guī)，尊重網(wǎng)上道德，承擔(dān)一切因您的行為而直接或間接引起的法律責(zé)任。

2.請(qǐng)您真實(shí)的反映產(chǎn)品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對(duì)產(chǎn)品有任何疑問(wèn),也可以留言咨詢。

3.未經(jīng)本站同意，任何人不得利用本留言簿發(fā)布個(gè)人或團(tuán)體的具有廣告性質(zhì)的信息或類似言論。

    您感興趣的產(chǎn)品*
    您的單位*
    聯(lián)系人*
    聯(lián)系電話*
    詳細(xì)地址*
    常用郵箱*
    請(qǐng)輸入您對(duì)我們的意見或建議*
    驗(yàn)證碼*

同類產(chǎn)品

訂購(gòu)流程

訂貨流程

產(chǎn)品訂購(gòu)說(shuō)明:

  

1、報(bào)價(jià)含普票、運(yùn)費(fèi)。

 

2、常用試劑備貨充足，除對(duì)溫度要求極其嚴(yán)格的產(chǎn)品當(dāng)天可發(fā)貨。

  

3、進(jìn)口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細(xì)情況請(qǐng)咨詢客服。

  

4、訂貨時(shí)間為工作日每周一至周五16:00之前。

  

5、如需代為檢測(cè)，標(biāo)本對(duì)環(huán)境溫度高，可聯(lián)系客服安排專人取樣（限省內(nèi)客戶）。

  

6、代測(cè)免收代測(cè)費(fèi)，一周出結(jié)果。

7、產(chǎn)品因運(yùn)輸途中包裝破損請(qǐng)拒絕簽收，做退回。我們將在24小時(shí)之內(nèi)為您補(bǔ)發(fā) 損壞產(chǎn)品。

8、如因單位財(cái)務(wù)制度原因，可申請(qǐng)先發(fā)貨，報(bào)賬后付款（此條款僅限醫(yī)院、學(xué)校信譽(yù)良好客戶）。

付款方式

普票匯款信息

  

賬 戶 名：上海生物

 

開 戶 行：中國(guó)銀行山東省分行營(yíng)業(yè)部

  

賬 號(hào)：2169 2341 6278

 為方便廣大客戶辦理貨款我公司提供多個(gè)銀行的賬戶，學(xué)校、醫(yī)院客戶購(gòu)買產(chǎn)品如因單位財(cái)務(wù)制度原因可先發(fā)貨待報(bào)賬后匯款，請(qǐng)及時(shí)告知銷售人員已做具體操作。