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產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 價格 |
MOLM-13細(xì)胞 | 懸浮 | 電詢 |
名稱 MOLM-13
種屬 人早幼粒白血病細(xì)胞
生長特性 懸浮
形態(tài) 圓形
培養(yǎng)基 RPMI-1640+10-20%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳 37 攝氏度
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
注意事項:
一:細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項
1. 您收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)完全融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),切勿再次低溫凍存;若尚留有干
冰,請立即將含有細(xì)胞的凍存管放入液氮中保存待用,并按指定條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高
溫環(huán)境。
2. 請您在接收細(xì)胞后的 4 周內(nèi)及時做復(fù)蘇培養(yǎng),以確認(rèn)細(xì)胞活力、狀態(tài)并保種。逾期恕不受理售后
問題,謝謝合作!
二:貼壁細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加 1~2 ml 含 0.05% EDTA 的胰酶進(jìn)行消化
(37 度細(xì)胞培養(yǎng)箱注意把握消化時間,通??刂圃?1~2min)。
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小變圓變亮?xí)r輕輕拍打瓶身,加 3~5ml 完全培養(yǎng)基終止消化,
輕輕吹打細(xì)胞懸液,盡量把細(xì)胞全部吹落、吹散。
3. 取全部細(xì)胞懸液放入離心機離心 1500 轉(zhuǎn) 5min,離心后去上清,完全培養(yǎng)基重懸后轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)
皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液,待細(xì)胞密度達(dá)到 80-90%以后重復(fù)傳代操作或者凍存。
三:懸浮細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作)
1. 懸浮細(xì)胞常規(guī)傳代操作為半量換液,分瓶傳代,即取出一半細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添
加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);也可根據(jù)細(xì)胞密度分多瓶傳代。
2. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液,待細(xì)胞密度達(dá)到 70-80%時重復(fù)傳代操作或者凍存。
四:半貼壁半懸浮細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(請嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作)
1. 若懸浮細(xì)胞較多且折光率良好,可離心收集,繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 若有少量細(xì)胞懸浮,也可不用收集,傳代操作按常規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程處理。
3. 若懸浮細(xì)胞較多,離心收集,原瓶中貼壁細(xì)胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程進(jìn)行消化、終止消化、
吹打,并與之前收集的懸浮細(xì)胞混懸,分瓶培養(yǎng)。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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