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TMB(四甲基聯(lián)苯胺)是辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase、HRP）的顯色底物，在辣根過氧化物酶和H2O2存在時(shí)，TMB會(huì)產(chǎn)生可溶性藍(lán)色產(chǎn)物（光吸收在370nm），加入硫酸后，溶液呈黃色，此時(shí)可以在450nm 測定吸光度，因此TMB和H2O2一起常用于檢測HRP的存在。跟HRP的其他底物（如ABTS和OPD）相比，TMB不但靈敏，而且無毒，所以在ELISA 中的應(yīng)用日趨廣泛。傳統(tǒng)的TMB顯色試劑一般由兩個(gè)組份組成（另一個(gè)是H2O2），必須在使用前新鮮配制，并且容易產(chǎn)生沉淀，使用相對(duì)不太方便，并且也容易導(dǎo)致操作誤差。為克服這些缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了只有一個(gè)溶液的一管式TMB顯色液

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 即開即用，操作簡單，用戶不需要配制任何溶液。

2. 顯色液只是單一溶液，簡化了操作步驟，降低了操作誤差，結(jié)果更加穩(wěn)定。

3. 既可用于ELISA 等的顯色液，也可以用于檢測血液或血紅蛋白等樣品中的過氧化物酶含量。

4. 該底物溶液含TMB、H2O2和特殊的穩(wěn)定劑，可以在4℃長期放置。

5. 分沉淀可溶型（BTN91101A型，適用于ELISA）和沉淀不可溶型（BTN91101B型，適用于Western印跡膜免疫檢測）兩種。

保存條件：2-8℃避光保存，有效期一年。

使用方法：

1. 在酶標(biāo)板的每個(gè)孔中直接加入100μl 或150μl 本產(chǎn)品（A 型）。

2. 室溫溫育5-30分鐘。

3. 向每個(gè)孔中加入100μl 或150μl 終止液。將酶標(biāo)板置于酶標(biāo)儀中，450 nm 處讀取數(shù)據(jù)。

疑難解答：

Q：在ELISA 底物反應(yīng)過程中，為何有些孔呈藍(lán)色，而另外的孔呈藍(lán)綠色？

A: 這是TMB 底物反應(yīng)過程中的正�，F(xiàn)象，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。這是由于辣根過氧化物酶的濃度過高引起的，建議降低二抗的濃度。

Q：ELISA顯色時(shí)為何孔中會(huì)出現(xiàn)沉淀？

A：HRP 濃度過高，建議降低二抗-HRP 濃度或加入100μl 冰醋酸以溶解沉淀。

Q：如何降低背景讀數(shù)？

A：建議降低一抗或二抗?jié)舛龋娱L封閉時(shí)間。

一管式TMB顯色液(可溶型)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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