產(chǎn)品目錄

產(chǎn)品說明：增強(qiáng)型蛋白印跡膜再生液能夠安全高效地從硝酸纖維素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗，且不會(huì)破壞抗原，從而再次檢測(cè)化學(xué)發(fā)光的免疫印跡。與重新跑一個(gè)SDS-PAGE 膠比較，不僅省時(shí)省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強(qiáng)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.不需重新制膠電泳

2.節(jié)省珍貴樣品，在同一張膜上使用相同的樣品重新檢測(cè)

3.高效，去除效果遠(yuǎn)優(yōu)于自制緩沖液

4.溫和配方，在抗體剝離及重新檢測(cè)時(shí)不會(huì)對(duì)靶蛋白造成傷害

5.不含硫醇，無刺鼻氣味

產(chǎn)品應(yīng)用：

1.可重復(fù)使用硝酸纖維素膜或PVDF 膜，通過不同的一抗檢測(cè)不同的標(biāo)靶

2.可重新檢測(cè)印跡，改正或優(yōu)化初次實(shí)驗(yàn)中無效的抗體濃度

注意事項(xiàng)：

1.剛從冷凍保存中拿出來會(huì)出現(xiàn) SDS的沉淀，建議溫水溶解再使用。

2.建議先檢測(cè)表達(dá)量較低的目的蛋白，用再生液處理后檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白。

3.本品適用于 NC 膜和 PVDF 膜，推薦使用 PVDF 膜，效果更佳。

4.本產(chǎn)品適用于 HRP 標(biāo)記的二抗，且用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的印跡膜。

需要材料：

1.化學(xué)發(fā)光底物

2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS

3.用于第一次和第二次蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)的一抗和二抗

4.膠片，化學(xué)發(fā)光成像儀

使用方法：

注：膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中，直到可以進(jìn)行剝離程序。

1．將再生液用溫水溶解或室溫平衡至溶解。

2．用 TBS-T或PBS-T 將膜洗10分鐘×3次。

3．將印跡膜放入再生液中，室溫孵育20-30分鐘。使用足夠的體積以確保印跡膜完全潤(rùn)濕(對(duì)于8×10cm 印跡需要約 20mL)。

注意：優(yōu)化孵化時(shí)間和溫度對(duì)于獲得最佳結(jié)果是必不可少的。對(duì)于一些抗體，室溫孵育就足夠了。

然而，高親和力抗體可能需要再溫育5至10分鐘。

4.用 TBS-T或PBS-T將膜洗10分鐘×3次。

5.按如下方法檢測(cè)：

A.完整去除二抗的測(cè)試：將膜進(jìn)行發(fā)光檢測(cè)，如果 5分鐘內(nèi)未檢測(cè)到信號(hào)，則二抗已經(jīng)成功地從抗原或一抗中去除。

B.完整去除一抗的測(cè)試：用 HRP 標(biāo)記的二抗孵育膜，然后用洗滌緩沖液洗滌。孵育新的一抗和二抗，進(jìn)行發(fā)光檢測(cè)，如果 5分鐘內(nèi)沒有檢測(cè)到信號(hào)，則已經(jīng)成功地將一抗從抗原中除去。

6.如果在步驟 5 中檢測(cè)到信號(hào)，則返回步驟 2，再剝離 5-15分鐘。一些抗原/抗體系統(tǒng)需要更高的溫度或更長(zhǎng)的孵育時(shí)間來完全去除它們。優(yōu)化剝離時(shí)間和溫度以確保完全去除抗體，同時(shí)防止對(duì)抗原的損傷。

增強(qiáng)型蛋白印跡膜再生液細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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