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堿性磷酸酶也稱堿性磷酸酯酶，可以在堿性條件下催化磷酸酯鍵的水解。哺乳動物中，肝臟、膽管、腎臟、骨頭和胎盤中的堿性磷酸酶活性比較高。常見的堿性磷酸酶包括腸道堿性磷酸酶、非組織特異性堿性磷酸酶和胎盤堿性磷酸酶。常見的小牛腸堿性磷酸酶被廣泛用于二抗等的標(biāo)記最終用于蛋白和核酸等的檢測，也常用于DNA或RNA 5'和3'末端的去磷酸化(去單磷酸化)，特別是質(zhì)粒的5'末端去磷酸化以避免質(zhì)粒自連等。

干細(xì)胞，如iPS中，堿性磷酸酶的活性很高，常被用作iPS成功誘導(dǎo)的標(biāo)志。另外，分化的結(jié)腸癌細(xì)胞中堿性磷酸酶的活性也會顯著升高，被當(dāng)作結(jié)腸癌細(xì)胞分化程度定性和定量的指標(biāo)。此外，血清中堿性磷酸酯酶的升高，被稱作高堿性磷酸酶血癥，被認(rèn)為和惡性膽管阻塞、原發(fā)性膽管硬化、原發(fā)性硬化膽管炎、肝淋巴瘤和肝肉瘤等肝膽疾病密切相關(guān)。血清中堿性磷酸酶活性升高還和骨頭生成密切相關(guān)，因?yàn)閴A性磷酸酶是成骨細(xì)胞的副產(chǎn)物。血清中堿性磷酸酶活性過低也和一些疾病相關(guān)。兒童和孕婦血清中的堿性磷酸酶活性較普通人高一些。血清中堿性磷酸酶活性范圍在20-140U/L。除胎盤堿性磷酸酶以外，其它的內(nèi)源性堿性磷酸酶加熱后易失活。

Para-nitrophenyl phosphate是一種常用的磷酸酶顯色底物，在堿性條件下，可在堿性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol在堿性條件下，呈黃色產(chǎn)物，可以在400-415nm檢測吸光度。產(chǎn)物黃色越深，說明堿性磷酸酶檢活性越高，反之則酶活性越低。據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出堿性磷酸酶活性水平。

注意事項(xiàng)：

1. 如果希望進(jìn)行酶活性的絕對定量，進(jìn)行酶反應(yīng)時(shí)必須注意精確計(jì)時(shí)。此時(shí)推薦采用孵育30分鐘等較長的時(shí)間，以減小操作過程中的時(shí)間誤差。同時(shí)如果樣品中酶活性較高，則可以預(yù)先適當(dāng)稀釋樣品。

2. 樣品溶液中須避免出現(xiàn)EDTA、氟離子、檸檬酸鹽等堿性磷酸酶的抑制劑。

3. 檢測緩沖液和p-nitrophenol溶液對人體有害，請注意適當(dāng)防護(hù)。反應(yīng)終止液有腐蝕性，請小心操作。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

堿性磷酸酶檢測試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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