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對(duì)于非固定的活細(xì)胞來(lái)說(shuō)，hoechst33342 可以起到區(qū)別凋亡和正常細(xì)胞的作用，因?yàn)榈蛲黾?xì)胞的膜通透性增強(qiáng)，因此進(jìn)入細(xì)胞中的Hoechst 33342 比正常細(xì)胞的多，熒光強(qiáng)度要比正常細(xì)胞中要高，此外，凋亡細(xì)胞的染色體DNA 的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA 結(jié)合。

對(duì)于細(xì)胞的稱染來(lái)說(shuō)，可以配以適當(dāng)?shù)?.1% Triton X-100 通透，從而是所有細(xì)胞細(xì)胞核有效的染上hoechst 染料。

操作注意事項(xiàng)

1. 臨用前，計(jì)算好用量，以無(wú)水DMSO 溶解固體Hoechst33342 至10mg/mL,避光，-20℃保存。臨用前，以去適當(dāng)體積的染料儲(chǔ)液以10mM PBS（pH7.2~7.6）稀釋10 倍后即可使用，染料采用室溫孵育即可。

2. 用Heochst 33342 染料與細(xì)胞孵育的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，一般控制在20min 之內(nèi)為宜。如果太長(zhǎng)可引起Heochst 33342 的發(fā)射光譜由藍(lán)光向紅光的遷移，從而影響結(jié)果的判斷。

3. 染料有毒，操作時(shí)要戴手套。

4. 熒光顯微鏡觀察：Hoechst 33342 用氪激光激發(fā)的紫外光，激發(fā)波長(zhǎng)為352nm，發(fā)射波長(zhǎng)為400～500nm，產(chǎn)生藍(lán)色熒光。

儲(chǔ)存：-20℃，避光，有效期12個(gè)月。

細(xì)胞核染料Hoechst 33342細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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