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檢測原理：細胞在發(fā)生凋亡時，會在生理生化和細胞形態(tài)上發(fā)生一系列變化，在凋亡中晚期，激活的DNA內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA，DNA會被降解成為約180bp-200bp的片段，而正?；蛘咴鲋臣毎苌侔l(fā)生DNA斷裂。利用這個差異，用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT酶）把Biotin標(biāo)記的dUTP標(biāo)記到斷裂DNA片段的3’-OH末端，用POD檢測標(biāo)記并用底物顯色，然后進行顯微鏡觀察，這個方法被稱為TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法細胞凋亡檢測。

產(chǎn)品優(yōu)勢和特點：TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒，集成了不同廠家產(chǎn)品的諸多特長，形成獨特優(yōu)勢和特點：

★ 采用的重組TdT突變體酶活性更高，該轉(zhuǎn)移酶的比活是其他試劑盒里TdT活力的10倍，同樣情況下，不被標(biāo)記的3’-OH 末端可以順利標(biāo)記上Biotin，因此檢測靈敏度更高；

★ 試劑盒對標(biāo)記反應(yīng)的底物進行了反復(fù)優(yōu)化，采用最佳比例的Biotin-dUTP和未標(biāo)記的dNTP進行3’ -OH末端的核苷酸摻入，使得同一個斷裂的DNA片段末端可以形成更長的“標(biāo)記尾巴”，該“標(biāo)記尾巴”一方面減少了相鄰摻入dNTP上Biotin-dUTP基團的空間位阻，同時增加了每個斷裂片段的Biotin基團數(shù)目，從而提高檢測靈敏度，同時減少非特異性反應(yīng)；

★ 非凋亡細胞由于缺乏大量的3’-OH 末端，不會被顯著摻入和標(biāo)記Biotin基團；

★ SA-HRP(POD)是采用定點標(biāo)記技術(shù)，不影響SA（鏈親和霉素）與Biotin的結(jié)合以及HRP的催化活力；

★ 應(yīng)用范圍廣，既可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。

檢測方法：顯微鏡

樣本類型：石蠟包埋組織切片、組織冰凍切片、細胞涂片以及貼壁細胞

儲存條件：試劑盒需儲存在-20℃非無霜冰箱中，避免反復(fù)凍融。建議分裝保存Biotin-標(biāo)記反應(yīng)混合物。

保存條件：-20°非無霜冰箱，避免反復(fù)凍融。建議分裝保存Biotin-標(biāo)記反應(yīng)混合物。

Tunel細胞凋亡檢測試劑盒（POD）細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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