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CFSE/PI 雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒是利用細(xì)胞熒光染料CFSE(CFDA-SE)和PI對細(xì)胞進(jìn)行染色，利用CFSE標(biāo)記靶細(xì)胞，PI標(biāo)記死的靶細(xì)胞來區(qū)分不同的細(xì)胞，活的靶細(xì)胞成綠色，死的靶細(xì)胞成紅色和綠色，從而檢測細(xì)胞毒性作用。根據(jù)不同的實驗方案設(shè)計，可以用來檢測化合物的細(xì)胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細(xì)胞或NK 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用。

CFDA-SE 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細(xì)胞。CFDASE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料，可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。CFDASE在結(jié)構(gòu)上將酚羥基部位改造成AM體，所以自身不發(fā)熒光，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的CFDASE的AM 部位能被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解生成CFSE，通過共價結(jié)合賴氨酸側(cè)鏈的氨基而摻入細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞表面的蛋白，且結(jié)合后發(fā)出強(qiáng)的綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基部位結(jié)合，固定在細(xì)胞內(nèi)，不會漏出細(xì)胞外。CFSE進(jìn)入細(xì)胞后定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，在細(xì)胞核的熒光最強(qiáng)。

CFSE毒性小，不影響細(xì)胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿焖伲鼫�(zhǔn)確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。

CFSE/PI標(biāo)記細(xì)胞后通常用流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞毒性檢測。

CFSE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為516nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細(xì)胞呈紅色熒光，流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為647nm，使用流式細(xì)胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。

CFSE標(biāo)記的細(xì)胞除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞毒性外，還可單染后用于細(xì)胞增殖檢測，或者用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。

儲存條件：CFSE探針-20℃避光保存；溶解液-20℃保存；PI染色液2-8℃避光保存。

有效期：六個月。

CFSE/PI雙染細(xì)胞毒性檢測試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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