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熒光染料PKH67是一種可對活細胞進行熒光標(biāo)記的新型染料，可以標(biāo)記活體細胞，通過與膜結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)分子結(jié)合而標(biāo)記細胞。對細胞毒性較小，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，有著強而穩(wěn)定的綠色熒光。經(jīng)PKH67標(biāo)記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。

在細胞分裂增殖過程中，PKH67的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半，根據(jù)這一特性，它可被用于檢測細胞增殖，細胞周期的估算及細胞分裂等方面。PKH67標(biāo)記細胞的熒光非常均一，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，PKH67標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次(1/2的熒光強度)，二次(1/4的熒光強度)，三次(1/8的熒光強度)，以及更多分裂次數(shù)的細胞。PKH67可檢測分裂次數(shù)多達六次甚至更多。

除了用于細胞增殖檢測，PKH67 還可以用于細胞的體外盒體內(nèi)示蹤，標(biāo)記后熒光在胞內(nèi)表達穩(wěn)定，陽性標(biāo)記率達98%以上，標(biāo)記細胞形態(tài)良好，能有效地觀察細胞在體外的誘導(dǎo)分化情況；或?qū)?biāo)記的細胞注入體內(nèi)，可以有效的顯示移植細胞在活體組織中的遷移及分化。

PKH67標(biāo)記的細胞用于體內(nèi)觀察可以長達數(shù)周之久，它常被用來做活體細胞檢測實驗和用熒光電鏡觀察細胞長期活動的實驗。PKH67 毒性較小，不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單，且不用放射性同位素，不存在安全隱患�？梢愿焖�，更準確和更安全地得到想要的實驗數(shù)據(jù)。

PKH67/PI標(biāo)記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。

PKH67標(biāo)記細胞呈綠色熒光，熒光波長：λex=490 nm,λem=502 nm。流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為502nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標(biāo)記細胞呈紅色熒光，流式檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm，此時的發(fā)射波長為647nm，使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。

PKH67標(biāo)記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外，還可單染后用于細胞增殖檢測，或者用熒光酶標(biāo)板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。

儲存條件：-20℃避光保存。

PKH67/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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