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細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)

  • 產(chǎn)品貨號：CS-C6226
  • 產(chǎn)品價格：電議
  • 產(chǎn)品產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
  • 包裝類型:盒
  • 采購熱度：469
  • 庫存：100
  • CAS號：
  • 方法：
  • 含量：
  • 品牌名稱:莼試
  • 分子式：
  • 分子量：

簡介內(nèi)容：細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)價格優(yōu)惠、質(zhì)量保證、歡迎咨詢訂購！

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標簽:細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)圖片 細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)價格 

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中文名稱：細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
保存條件：-20℃冰凍保存一年。
工作原理：
在機體內(nèi)部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活
，細胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標記的
dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié)合在 DNA 斷點部位，可以通過生物標記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC)，然后加入顯色底物 
DAB 予以顯示。凋亡的細包核呈黃色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。
試劑盒內(nèi)容：
1.標記緩沖液(Labeling Buffer)5ml
2.末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)100μl
3.DIG-dUTP(×20)100μl
4.封閉液(Blocking Reagent)20ml
5.生物素化抗地高辛抗體(×100)100μl
6.SABC(×100)100μl
7.Proteinase K(×200)250μl
8．抗體稀釋液 20ml
陽性對照片2張
用戶自備試劑：
1．多聚賴氨酸或APES。
2．0.01M TBS,調(diào) pH 7.5(配法:1L 雙蒸餾水中加入 8.5 克氯化鈉,1.2 克 Tris，用純乙酸或鹽酸調(diào) pH。)
3．DAB顯色試劑盒，也可自配顯色劑。
操作步驟：
1．樣品處理
(1)玻片預(yù)先用多聚賴氨酸或APES 進行處理。
(2)細胞涂片和冰凍切片：最重要的是及時固定。用 4%多聚甲醛/0.01M PBS(pH7.0---7.6)室溫下固定 30—60分鐘。0.01M PBS洗2分鐘×2次。蒸餾水洗滌 2分鐘×2次。
(3)組織：有條件時應(yīng)及時固定。常規(guī) 4%多聚甲醛/0.01M PBS(pH7.0---7.6)或10%中性緩沖福爾馬林固定 4 小時以上，石蠟包埋。切片常規(guī)脫蠟入水(脫蠟務(wù)必干凈)。
2．新鮮配制 3%H2O2，室溫處理 10分鐘。蒸餾水洗滌 2分鐘×3次。
3．標本片加 0.01M TBS 1:200 新鮮稀釋 Proteinase K 37℃消化 1—15分鐘,0.01M TBS洗2分鐘×3次。(細胞涂片和冰凍切片一般不消化或消化 10—60 秒鐘。新鮮石蠟切片消化 5-10
分鐘。陳舊石蠟切片消化 10-15分鐘)。
4．標本片加標記緩沖液(Labeling Buffer)20μl/片,以保持切片濕潤。然后按每張切片取TdT和 DIG-d-UTP 各 1μl ，加入到 18μl 標記緩沖液中，混勻。甩去切片上多余液體后加
混合好標記液，20μl/片。置樣品于濕盒中，37℃標記2 小時。
5．0.01M TBS洗2分鐘×3次。
6．加封閉液 50μl/片，室溫 30分鐘，甩掉封閉液，不洗。
7．用抗體稀釋液 1：100稀釋生物素化抗地高辛抗體：(取 1ml 抗體稀釋液加生物素化抗地高辛抗體 10μl)，混勻后 50μl/片加至標本片上。置樣品于濕盒中，37℃反應(yīng) 30分鐘。
0.01M TBS洗2分鐘×3次。
8．用抗體稀釋液 1：100 稀釋 SABC：取 1ml 抗體稀釋液加 SABC 10μl，混勻后 50μl/片加至切片。37℃反應(yīng) 30分鐘。0.01M TBS洗5分鐘×4次。
9．DAB 顯色：取 1ml 蒸餾水，分別加入 DAB 試劑盒中 A，B，C 試劑各一滴，混勻后加至標本片上，顯色 10-30分鐘左右。水洗。
10．蘇木素輕度復(fù)染。0.01M TBS洗，蒸餾水洗。脫水，透明，封片。顯微鏡觀察。
細胞凋亡檢測試劑盒V(POD)細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調(diào)控。
⑤細胞分化及其調(diào)控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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3、進口原裝產(chǎn)品要3-6周的貨期，詳細情況請咨詢客服。

  

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