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在機(jī)體內(nèi)部隨時(shí)都在發(fā)生著細(xì)胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細(xì)胞的死亡，其特征為核染色質(zhì)的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚，時(shí)間也很短暫。凋亡的特征是內(nèi) 源性核酸內(nèi)切酶被激活，細(xì)胞自身的染色質(zhì)或DNA 被切割，出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口，并產(chǎn)生與 DNA 斷點(diǎn)數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將地高辛標(biāo)記的dUTP(DIG-dUTP)標(biāo)記至 3’-OH 末端，DIG-dUTP 結(jié) 合在 DNA 斷點(diǎn)部位，可以通過生物標(biāo)記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應(yīng)后，再結(jié)合鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化，在 568-574nm 發(fā)射熒光，呈鮮紅色，從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細(xì)胞。

試劑盒內(nèi)容：

1．標(biāo)記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

2．末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(TdT,×20)20μl

3．DIG-dUTP(×20)20μl

4．封閉液(Blocking Reagent)4ml

5．生物素化抗地高辛抗體(× 100)20μl

6．SABC-CY3(× 100)20μl

7．Proteinase K(×200)50μl

8 抗體稀釋液 4ml

陽(yáng)性對(duì)照片 2 張

用戶自備試劑

1．多聚賴氨酸或APES。

2．0.01M TBS,PH7.5(配法:1L 雙蒸餾水中加入 8.5 克氯化鈉,1.2 克 Tris和0.45—0.5ml 純乙酸。)

3．DAPI 染色液

4．水溶性封片劑或抗熒光衰減封片劑。

細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒IV(CY3)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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